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背景 胃粘膜损伤是临床常见病和多发病,包括胃炎和胃溃疡等,通常认为主要是胃粘膜的攻击因子和防御因子失衡所造成的。在药物治疗胃粘膜损伤方面,中药方剂一直都占有重要地位,自制健胃益气汤临床观察对胃炎和胃溃疡具有较好疗效,但其作用机制尚不十分清楚。 目的 建立无水乙醇致大鼠胃粘膜损伤试验模型,研究预先给予健胃益气汤对大鼠胃粘膜损伤的保护作用及其对胃粘膜组织细胞凋亡的影响的作用机制,为临床推广应用该方治疗胃粘膜损伤提供科学理论和实验依据。 方法 1.建立动物模型:本实验取雄性wistar大鼠40只,随机分4组,中药组、西药组、试验对照组、正常对照组。中药组给予健胃益气汤(10ml/kg),西药组给予丽珠得乐悬浮液(10ml/kg),两对照组给予等体积的生理盐水,分别灌胃,每日一次,连续四天。取材前禁食24小时,末次给药后30分钟,前三组分别无水乙醇灌胃(1mg/只),1小时后连同正常对照组,轻度乙醚麻醉后一同处死,解剖取胃。2.形态学观察:①测量胃粘膜损伤指数。②取腺胃区组织制作切片并作H-E及PAS染色,光学显微镜观察胃粘膜组织的病理变化。3.用免疫组织化学ABC法对大鼠胃粘膜组织细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax等做免疫组织化学研究,检测并通过图像分析对以上结果进行定性、定位、定量分析及统计学处理,研究Bcl-2、Bax的表达与胃粘膜损伤的关系以及健胃益气汤对胃粘膜细胞凋亡的影响。 结果 除正常对照组外,无水乙醇使各组大鼠均有糜烂或出血点形成,而中药(健胃益气汤)组的糜烂、出血明显减少,较试验对照组为轻。中药组损伤指数为26.87±6.84,与试验对照组的98.33±15.36比较有显著差异(P<0.01)。镜检H-E组织切片显示,试验对照组粘膜损伤明显,并有大量炎症细胞浸润。中药组粘膜损伤较轻,炎症细胞浸润少,与试验对照组比较有显著差异(P<0.01)。另外,通过光镜观察Alcian-PAS染色切片,中药组大鼠的粘液PAS阳性面积较多,粘膜PAS反应阳性层较厚,与试验对照组比较,其差异具有显著性意义(P<0.01)。经免疫组化染色,检测并用计算机图像分析系统定量分析,发现中药组的Bax蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表