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前言发生发展涉及多种原癌基因的激活和抑癌基因的失活.1996年Ohta等用差异显示分析探针和外显子捕获法确定了一个新的基因,由于该基因氨基酸测序结果与组氨酸三联体(histidine triad,HIT)蛋白具有高度同源性,而基因内又包含有FRA3B脆性位点,因此命名为脆性组氨酸三联体基因(Fragile Histidine Triad,FHIT).许多学者对多种肿瘤的FHIT基因进行了不同层面的研究,发现在绝大多数肿瘤中存在FHIT基因的异常,认为FHIT基因是一重要的候选抑癌基因.以往研究证明,nm23-H1基因与肿瘤的侵袭及转移抑制有关.该研究用免疫组化方法对Fhit及nm23-H<,1>蛋白在胃癌组织中的表达进行了检测,并分析了基因表达与胃癌临床病理因素之间的关系,为探讨FHIT及nm23-H<,1>基因在胃癌发生发展过程中的作用.方法1.免疫组化方法该实验免疫组化染色采用美国GBI技术有限公司近年推出的免疫组化检测二步法.Immuno-Bridge+试剂盒,兔抗人Fhit多克隆抗体(工作浓度1∶50)和鼠抗人nm23单克隆抗体(工作浓度1∶100)均购白北京中山生物技术有限公司,用PBS代替一抗作阴性对照.免疫组化染色结果判定以中山公司赠送阳性切片为阳性对照,以PBS代替一抗作阴性对照.结果判定:FHIT和nm23-H<,1>蛋白免疫染色阳性信号定位于细胞浆,呈棕黄色颗粒.每个标本随机观察5个高倍视野,每个视野计数200个细胞,取平均值.阳性细胞数<5％为阴性(-),5％-25％为弱阳性(+),25％-50％为中度阳性(++),>50％为强阳性(+++).2.统计学分析统计计数资料采用x<2>检验.P<0.05视为有显著统计学差异.结论1.胃癌组织中Fhit蛋白的缺失是频发事件,FHIT可能是胃癌发生中重要的候选抑癌基因.2.Fhit及nm23-H<,1>蛋白在胃癌中的表达与胃癌淋巴结转移密切相关,且可能共同起作用,可作为临床预测转移及估计预后的重要参考指标.