补肾方促成骨作用与调控骨髓Smad1,5,6基因表达的研究

来源 :上海中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhaomohans
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目的:研究补肾方对细胞信号转导因子Smad1,5,6 mRNA表达的影响,并探索其促成骨作用的机理。 方法:取12月龄自然衰老雄性大鼠200只随机分为4组,每组50只。分别给予生理盐水、补肾方(密骨胶囊)、桂枝汤、活性维生素D(萌格旺)灌胃,在鼠龄14、16、18、20、22月龄时,每组各取8只大鼠,取右侧股骨,以双能X线法(DEXA)检测骨矿密度(BMD);三点弯曲法检测骨生物力学性能;胫骨病理切片(HE染色)观察骨微结构;酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清骨碱性磷酸酶含量; Trizol法抽提左侧股骨骨髓总RNA,逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测Smadl,5,6基因表达,天能GIS凝胶图像处理系统分析各组表达灰度值。 结果:补肾方组与空白对照组(生理盐水组)比较可以维持骨密度、骨弹性模量,改善骨微观结构,提高血清骨碱性磷酸酶含量,上调Smad1,5 mRNA表达量,下调Smad6 mRNA表达量(P<0.05)。活性维生素D组与空白对照组相比可以维持骨密度、骨弹性模量,改善骨微观结构(P<0.05);对Smad1,5,6 mRNA的表达量影响不明显(P>0.05)。桂枝汤组与空白对照组相比无统计学差异(P>0.05)。 结论:补肾方维持骨强度改善骨生物力学性能的分子机制之一可能是上调骨髓Smad1,5 mRNA表达量,下调Smad6 mRNA表达量,从而维持骨髓基质细胞向成骨细胞的定向分化以及成骨细胞正常的成骨活性。
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