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目的:探讨机械通气诱导肺组织中升高的miR-21是否通过外泌体的方式导致肺部炎症,并确定其发挥作用的靶分子是否为Notch2。方法:实验分为三个部分:实验一:机械通气肺损伤中miR-21及Notch2的变化。实验分组:（1）对照组（Ctrl）;（2）MV 2h组;（3）MV 6h组;（4）MV 12h组,每组8只c57雄性小鼠。腹腔注射2%戊巴比妥麻醉后经气管切开进行机械通气,机械通气设置参数为:潮气量30ml/kg,呼吸频率100次/分,吸呼比（I:E）=1:1,呼气末正压（PEEP）=0mmHg,吸入氧浓度（FiO2）=21%。通气结束后经腹主动脉放血处死小鼠,结扎右肺门,行左侧肺灌洗收集肺泡灌洗液（BALF）,用BCA法检测BALF中总蛋白浓度,ELISA法检测BALF中炎症细胞因子IL-6,TNF-α含量;右侧肺上叶用于测量肺湿干比重,中叶进行HE染色观察肺组织病理结果,下叶进行Western blotting检测Notch2及Hes-1蛋白表达,楔叶用于提取总RNA,检测miR-21、Notch2 mRNA的表达。实验二:机械通气释放外泌体携带miR-21通过负调控Notch2导致肺部炎症。实验分组:据实验一选取通气12小时作为该部分实验的时间点,（1）Ctrl组;（2）MV 12h组;（3）GW4869+MV 12h组,每组8只c57雄性小鼠。通气前1小时GW4869+MV 12h组尾静脉注射GW4869,剂量为2.5μg/g;Ctrl组及MV 12h组尾静脉注射等剂量的2.5%DMSO,按照第一部分实验内容进行机械通气。通气结束后收集BALF进行超速离心获得外泌体并通过透射电镜进行鉴定,PCR检测外泌体中miR-21含量;检测BALF中总蛋白浓度,炎症细胞因子IL-6、TNF-α的含量;观察肺组织病理切片HE染色片,评估肺损伤程度;检测肺组织中Notch2mRNA及蛋白表达情况,检测肺组织中Notch2下游分子Hes-1的蛋白表达情况。实验三:在细胞上研究Notch2可作为miR-21的下游靶基因。Raw264.7细胞系随机分为以下几组:（1）miR-21 negative control组（NC）;（2）miR-21 mimic组（miR-21 mimic）;（3）miR-21 inhibitor组（miR-21 inhibitor）。转染72小时后用RT-PCR法检测Notch2 mRNA的表达情况,用Western blotting检测Notch2蛋白表达情况。结果:实验一结果显示,与对照组相比,通气组中肺泡结紊乱、炎性细胞浸润、肺泡壁增厚充血,且通气12小时组比通气2小时和6小时组的肺泡壁增厚更明显、肺泡结构破坏更严重,而对照组肺泡形态结构正常,几乎无炎性细胞浸润;通气12小时组中肺组织湿干比重、BALF中总蛋白含量、BALF中细胞因子IL-6和TNF-α增加最为明显;机械通气可导致肺组织中miR-21表达水平增加、Notch2mRNA表达降低,Notch2和Hes-1蛋白表达降低,且在通气12小时组中改变最明显。实验二结果显示,机械通气可导致外泌体释放进入BALF中,且RT-PCR检测外泌体中的miR-21发现,MV 12h小时组中miR-21明显高于Ctrl组;尾静脉给予外泌体释放抑制剂GW4869后再通气12小时BALF中miR-21的含量明显降低;与MV 12h组相比,GW4869+MV 12h组中肺部炎症细胞浸润、肺泡壁充血及肺泡壁增厚等情况均有明显改善,BALF中总蛋白含量、BALF中细胞因子IL-6和TNF-α含量降低;肺组织中Notch2 mRNA及蛋白表达增加,Hes-1蛋白表达增加。实验三结果显示转染miR-21 mimic后,Notch2 mRNA及蛋白表达增加;转染miR-21 inhibitor后,Notch2 mRNA及蛋白表达降低。结论:机械通气诱导含有miR-21的外泌体释放并且miR-21可通过负调控Notch2促进肺部炎症反应。