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目的：研究蚯蚓活性组分（EWAs）对内质网应激（ERS）介导的肝损伤的保护作用及作用机制 方法：1.EWAs的提取：以新鲜冰冻赤子爱胜蚯蚓（eisenia foetida）为原材料，采用胶体磨匀浆、乙醇沉淀、冷冻干燥和Sephadex G-25层析脱盐等步骤制备 EWAs，对 EWAs的理化性质进行初步研究。2.构建衣霉素诱导的 L02细胞（人正常肝细胞系）ERS模型：培养 L02细胞，分为空白对照组和衣霉素组，衣霉素组用浓度为20、40、60、80和100μg/ml的衣霉素分别作用12、24和48h，用 MTT法检测不同浓度衣霉素对 L02细胞增殖率的影响，计算 IC50值；用TUNEL法检测衣霉素作用不同时间后L02细胞的凋亡情况；用Western blot检测衣霉素作用不同时间后 ERS标志性因子 GRP78和 CHOP的表达水平。3.研究 EWAs对 ERS介导的受损 L02细胞的保护作用及分子机制：在 L02细胞的 ERS模型（衣霉素60μg/ml作用24h）的基础上，用不同浓度 EWAs作用24h，用 MTT法检测 EWAs对衣霉素诱导的受损 L02细胞增殖率的影响；用TUNEL法检测高、低剂量 EWAs对受损 L02细胞凋亡情况的影响；用 Western blot及RT-PCR检测高、低剂量EWAs作用前后，ERS特异性凋亡因子CHOP及其上游信号通路因子PERK、eIF2a和ATF4蛋白和mRNA的表达情况。 结果：1.成功获取 EWAs，收率为12％，外观为黄白色絮状物，极易溶于水，蛋白含量为57.64%，主要是分子量在20KDa以下的小肽。2.成功构建衣霉素诱导的 L02细胞的 ERS损伤模型。最佳诱导条件为60μg/mL衣霉素作用24h。3. MTT实验结果显示，与模型组相比，0.2、0.4、0.8、1.2和1.6mg/mL的EWAs作用24h后，EWAs可促进ERS介导的受损L02细胞的增殖，并呈现剂量依赖性（P<0.05）；4. TUNEL结果显示，0.4mg/mL和1.2mg/mL的EWAs作用24h后，模型组中 L02细胞的凋亡指数明显较空白对照组显著增高（ P<0.01），与模型组相比， EWAs高、低剂量组的凋亡指数明显减少（P<0.01）；5.Western blot结果显示，模型组中ERS特异性凋亡因子CHOP及其上游信号通路因子 PERK、eIF2a和 ATF4蛋白的表达明显高于空白对照组（P<0.01），与模型组相比，EWAs可显著减少受损 L02细胞中 ERS特异性凋亡因子 CHOP及其上游信号通路因子 PERK、eIF2a和 ATF4蛋白的表达（P<0.01）；6. RT-PCR结果显示，模型组中 ERS特异性凋亡因子 CHOP及其上游信号通路因子 PERK、eIF2a和 ATF4 mRNA的表达明显高于空白对照组（P<0.01），与模型组相比，EWAs可显著减少受损 L02细胞中 ERS特异性凋亡因子 CHOP及其上游信号通路因子 PERK、eIF2a和 ATF4 mRNA的表达（P<0.01）。 结论：1.建立了 EWAs的提取方法。2.成功构建了衣霉素诱导的 L02细胞的 ERS损伤模型，最佳诱导条件为：衣霉素浓度60μg/mL作用24h。3. EWAs对ERS介导的受损L02细胞有显著的保护作用，并能够促进受损 L02细胞的增殖，减少 L02细胞的凋亡， EWAs的这种保护机制可能与抑制 PERK-eIF2a-ATF4信号通路，下调CHOP，减轻ERS有关。