论文部分内容阅读
目的：检测卵巢肿瘤组织中miR-218的表达水平，分析其表达差异与临床病理特征之间的关系，初步评价其作为卵巢恶性肿瘤潜在诊断靶标的可能性。观察miR-218在上皮性卵巢癌细胞株的增殖、凋亡、侵袭转移方面发挥的生物学效应，进一步探讨miR-218在卵巢癌发生发展过程中的作用。方法：采用实时定量PCR的方法分别检测卵巢良性、交界性、恶性肿瘤组织中miR-218的表达水平，并结合临床病理特征进行分析。使用Receiver OperatorCharacteristic Curve（ROC曲线）判断miR-218作为卵巢恶性肿瘤潜在诊断靶标的可能性。通过在上皮性卵巢癌细胞株HEY、SKOV3中分别转染miR-218mimics和miR-218inhibitor以达到上调或下调miR-218的表达水平。利用MTT、AnnexinV-FITC/PI双染法—流式细胞仪、Transwell实验观察miR-218对上皮性卵巢癌细胞株增殖、凋亡和侵袭转移的作用。结果：1、 miR-218在卵巢交界性和恶性肿瘤组织中表达水平显著高于其在良性肿瘤组织中的表达水平（P<0.01）。2、根据FIGO临床分期，卵巢癌晚期（III期、IV期）样本中miR-218的表达水平高于它在卵巢癌早期（Ⅰ期、Ⅱ期）样本中的表达水平（P<0.05），但在年龄、组织学分类、分化程度和淋巴结转移方面miR-218的表达水平无差异（P>0.05）。3、通过ROC曲线分析相较于卵巢良性肿瘤，miR-218在卵巢恶性肿瘤中曲线下面积为0.8054（95%可信区间：0.7140—0.8968），最佳截断点为0.0069，其灵敏度与特异度分别是69.23%，88%。4、miR-218在上皮性卵巢癌细胞株HEY中的表达水平显著高于SKOV3和OVCAR3（P<0.05），其在SKOV3中的表达水平高于OVCAR3（P<0.05）。5、细胞增殖实验：与各自对照组相比，转染miR-218mimics48小时后上皮性卵巢癌细胞株HEY在490nm处光密度值增高（P<0.05）；转染miR-218mimics72小时后则有HEY、SKOV3在490nm处光密度值增高（P<0.05）；转染miR-218inhibitor72小时后，HEY、SKOV3在490nm处光密度值降低（P<0.05）。6、细胞凋亡及侵袭转移实验：与各自对照组相比，分别转染miR-218mimics、miR-218inhibitor后上皮性卵巢癌细胞株HEY、SKOV3细胞凋亡无明显差异（P>0.05）。结论：1、miR-218在卵巢癌中表达上调且在晚期患者中的表达水平高于早期。2、miR-218调节上皮性卵巢癌细胞株HEY、SKOV3的增殖能力，但对细胞凋亡及侵袭转移无影响。