【摘 要】
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目的：研究鱼藤素对人胰腺癌Panc-1细胞增殖、周期、凋亡和自噬的影响，初步探讨鱼藤素诱导人胰腺癌Panc-1细胞发生自噬的机制。方法：CCK-8法检测鱼藤素对人胰腺癌Panc-1细胞增殖
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目的：研究鱼藤素对人胰腺癌Panc-1细胞增殖、周期、凋亡和自噬的影响，初步探讨鱼藤素诱导人胰腺癌Panc-1细胞发生自噬的机制。方法：CCK-8法检测鱼藤素对人胰腺癌Panc-1细胞增殖的影响；PI染色法检测鱼藤素对人胰腺癌Panc-1细胞周期的影响；AnnexinV-FITC法检测鱼藤素对人胰腺癌Panc-1细胞凋亡的影响；单丹(磺)酰戊二胺(MDC)染色法和吖啶橙/溴乙啶（AO/EO）染色法检测鱼藤素对人胰腺癌Panc-1细胞自噬的影响；免疫印记（WesternBlot）技术检测鱼藤素对人胰腺癌Panc-1细胞周期蛋白、凋亡蛋白、自噬蛋白及Akt-mTOR和MAPK信号通路蛋白的表达的调节作用。结果：鱼藤素干预24h、48h、72h后，Panc-1细胞的存活率明显下降，并呈药物浓度和作用时间依赖性（P＜0.05）；鱼藤素干预24h、48h后Panc-1细胞G2/M期比例明显增加，周期蛋白cylinA、cylinB、cdk2、p-cdc25和p21表达呈增加，cylinD1、cylinD3、cdk4、cdk6表达减少；药物干预48h后，低浓度的鱼藤素没有促进Panc-1细胞发生凋亡的作用（P＞0.05），高浓度的鱼藤素（100μM、200μM）可以诱导Panc-1细胞发生部分凋亡（P＜0.05）；鱼藤素干预48h后，经MDC染色和AO/EO染色后，Panc-1细胞内的点状阳性结构和橘红色荧光明显增加；免疫印记技术检测Atg5、Atg7和LC3Ⅱ表达明显增加，p-Akt、p-mTOR表达减少，p-Erk、p-p38、p-Jnk表达增加。结论：鱼藤素可以明显抑制Panc-1细胞的增殖并诱导细胞自噬的发生，引起周期相关蛋白表达的改变；鱼藤素是通过激活自噬蛋白表达、调控Akt/mTOR和MAPK信号通路诱导Panc-1细胞自噬的发生。
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