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背景: 随着围产医学的发展,早产儿存活率较前有了明显的提高,但早产儿脑损伤发生率未见下降,研究发现促红细胞生成素对早产儿脑损伤具有一定的神经保护作用。 目的: 1.早产儿脑白质损伤(White Matter Damage,WMD)动物模型的构建; 2.探讨重组人促红细胞生成素(Recombinant Human Erythropoietin,rhEPO)对3日龄WMD大鼠的神经保护作用。 方法: 新生3日龄(P3)SD大鼠120只随机分为对照组,WMD组和rhEPO治疗组,对照组仅分离左侧颈总动脉,不结扎、不缺氧,rhEPO治疗组大鼠结扎左侧颈总动脉,术后6％氧气+94%氮气混合气中缺氧2.5小时,WMD模型建立后立即按5000IU/kg腹腔注射一次rhEPO,WMD组大鼠造模方法同rhEPO治疗组,模型建立后腹腔注射等量的生理盐水,实验中测量三组大鼠不同时间点体质量变化,并于术后24h、生后7d、生后21d断头取脑,测量脑重量,石蜡包埋切片,行常规HE染色、MBP免疫组化,生后30d进行悬吊试验、斜坡试验及旷场试验等神经行为学检测试验。 结果: 1.WMD组和rhEPO组大鼠缺氧缺血后均出现行为异常改变,WMD组术后体质量增长明显落后于rhEPO组和对照组,差异有统计学意义[术后24h:(7.2±0.3)比(8.2±0.8)、(9.5±0.4),生后7d:(10.1±0.5)比(13.4±0.5)、(15.3±0.3),生后21d:(30.5±0.4)比(43.7±0.5)、(48.4±0.5),p均<0.05]; 2.术后24小时对照组皮质白质分界清晰,细胞排列整齐,胼胝体细胞呈规则纤维状排列,WMD组皮质白质分界消失,细胞排列紊乱,可见核固缩,皮质下组织可见疏松改变,胼胝体细胞稀疏,rhEPO组核固缩及组织疏松情况较WMD明显减轻;生后21天WMD组胼胝体变薄,侧脑室明显扩大,rhEPO组侧脑室轻度扩大; 3.免疫组织化学:三组术后24h均未见MBP染色,生后7d对照组,rhEPO组胼胝体、皮质下白质可见一定程度的MBP染色,WMD组未见明显MBP染色,生后21d对照组,rhEPO组胼胝体、皮质下白质可见大量MBP染色,WMD组MBP染色明显减少; 4.神经行为学:WMD组大鼠玻璃棒悬吊时间明显短于rhEPO组和对照组;斜坡试验中WMD组大鼠转头时间明显长于rhEPO组和对照组,差异均具有统计学意义[悬吊试验(min):(1.8±0.4)比(3.8±0.4)、(4.0±0.2),斜坡试验(s):(9.3±0.8)比(4.4±0.7)、(3.8±0.5),p均<0.05];旷场及拒俘反应试验中WMD组大鼠的评分均明显低于rhEPO组和对照组,主要表现为行为迟缓,穿越方格数少及容易被抓取,很少回避及逃脱[旷场试验(分):(4.8±0.9)比(11.4±2.2)、(11.9±1.8),拒俘反应试验(分):(1.0±0.6)比(3.1±1.0)、(3.4±1.1),p均<0.05]。 结论: 1.3日龄SD大鼠单侧颈总动脉结扎+缺氧2.5h可成功构建WMD模型; 2.rhEPO可减轻WMD大鼠脑白质损伤,改善少突胶质细胞的成熟障碍及髓鞘发育延迟,促进神经生长修复,改善后期的神经行为表现。