3-溴丙酮酸对人宫颈癌HeLa细胞的抗肿瘤作用

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研究目的:观察3-溴丙酮酸(3-bromopyruvate,3-BrPA)对人宫颈癌HeLa细胞的抗肿瘤作用及其对放化疗敏感性的影响。研究方法:1四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测3-BrPA对HeLa细胞增殖及化疗的影响;2应用Hoechst33258染色在荧光显微镜观察下3-BrPA作用后的HeLa细胞;3流式细胞仪检测3-BrPA作用于HeLa细胞后细胞周期分布及死亡情况;4克隆形成实验检测3-BrPA联合不同X线照射剂量的HeLa细胞存活率,计算放射敏感性相关参数,评价增敏效果。研究结果:1MTT检测发现不同浓度(50、100、150、200、250μmol/L)3-BrPA作用于HeLa细胞24h及200μmol/L3-BrPA分别作用于HeLa细胞不同时间(2、4、6、24h)后,随着药物浓度及时间的增加,以剂量及时间依赖性的方式明显抑制细胞增殖(P<0.01);小剂量3-BrPA(25μmol/L)单独作用HeLa细胞72h后MTT检测显示细胞增殖抑制率为(16.7±3.4)%,分别与低剂量化疗药物DDP(5mg/L,10mg/L)联合作用72h后,细胞增殖抑制率为则分别由(36.6±2.3)%和(76.5±2.1)%上升到(84.5±0.9)%和(94.7±2.5)%(均P<0.01);2Hoechst33258染色后荧光显微镜下呈现典型的凋亡核固缩表现,可见凋亡小体;3细胞周期分析结果显示3-BrPA(>50μmol/L)作用于HeLa细胞后G2/M期细胞增多(P<0.01),G0/G1期细胞减少(P<0.01)。流式细胞仪结果表明3-BrPA以促进细胞坏死和凋亡两种形式抑制细胞增殖,并表现出剂量依赖性,与对照比较有显著的统计学差异(P<0.01);4克隆形成实验显示小剂量3-BrPA(25μmol/L)加放射组与单纯放射组相比致死剂量(Do)、准域剂量(Dq)分别由2.18Gy、1.44Gy下降至1.64Gy、0.78Gy。联合组与放射组相比,反映放射敏感性的指标Do、Dq均下降。放射增敏比(SER)=1.34。研究结论:3-BrPA对宫颈癌HeLa细胞增殖有显著抑制作用,可诱导细胞期阻滞和细胞死亡,增加HeLa细胞对放化疗的敏感性。本实验研究了3-BrPA通过干预细胞糖酵解遏制能量代谢来抑制宫颈癌HeLa细胞的增殖,旨在为宫颈癌治疗寻找新途径。
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