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背景：真核生物基因组中广泛存在U-BoX基因，其编码蛋白质大部分是泛素系统中决定底物特异性识别的E3蛋白质，其构象与RING-finger 极其相似。U-BoX蛋白质能促进底物蛋白质泛素化降解，对细胞内异常蛋白质的降解及质量控制方面发挥着重要的作用。水稻基因组中有77个U-BoX蛋白质，系统了解他们的表达可为功能研究提供数据。
研究目的：制备针对水稻U-BoX蛋白质的抗体，了解水稻中U-BoX蛋白质在不同发育时期的表达信息，为功能研究积累数据。
材料与方法：选取5个水稻U-BoX蛋白质，其共同结构特点为U-BoX结构在N端，C 端有ARM 结构重复。用计算机软件预测抗原决定簇，细菌体系体外表达、纯化U-BoX蛋白质的片段，免疫动物制备多克隆抗体，用Western blotting 检测U-Box蛋白质在水稻品种93-11 苗期地上部和地下部、分蘖期根和茎、孕穗期剑叶和幼穗、开花期剑叶和穗子、成熟期剑叶和种子中的表达，并与EST数据库中公布的U-Box基因EST数据进行了比较分析。
结果：体外克隆表达后，获得了纯化的蛋白质，制备的抗体特异性强，Westernblotting 检测可见一条明显的主带，其中Os06g01304和Os12g38210两个蛋白质的表观分子量与预测分子量相符，Os01g66130、Os02g49950和Os08g01900 三个蛋白质的表观分子量低于预测分子量。5个U-BoX蛋白质在水稻生长发育的不同时期或部位基本上是组成型表达，且表达量接近。对NCBI上公布的来自274个文库的100 万条以上的EST 进行分析，可以看出5个U-BoX蛋白质EST的数量分布大致均匀，与Westernblotting 结果揭示的组成型表达平行，与ATPase、HSP81-3、EGF-1 alpha和RuBisCo等对照基因相比，U-BoX基因的EST数目相对很少，说明它们属于低丰度转录的基因。
结论：选取5个水稻U-BoX蛋白质，通过抗原决定簇预测，表达片段蛋白质，制备了特异性抗体，证明了这一技术路线的可行性。利用抗体对水稻不同发育时期材料进行蛋白质表达谱研究，发现这些U-BoX蛋白质呈组成型表达，与EST数据揭示的结果具有平行性。所制备的抗体也为相关功能研究，如免疫共沉淀、ChIP-on-chip、Pull-down以及在抗病、抗逆反应中U-BoX蛋白质的表达等积累了资源。