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诱导肿瘤细胞凋亡是多种癌症治疗方法之一。在癌症治疗中肿瘤坏死因子受体（TNFR）超家族的死亡受体已经成为最具有潜力的治疗靶位点之一。DR5（Death receptor 5）是TNFR超家族成员之一,胞内结构含有死亡结构域（Deathdomain,DD）,与其配体TRAIL（TNF-related apoptosis-inducing ligand）特异性结合后介导TRAIL的凋亡信号,最终导致肿瘤细胞凋亡。抗人DR5单克隆抗体能够有效杀死肿瘤细胞,并对正常细胞无细胞毒作用,因而成为抗肿瘤抗体药物研究和开发的热点。但是单抗制备繁琐且成本高,在临床上尚难广泛应用。而多克隆抗体制备简单且价格便宜。目前尚未见抗人DR5多克隆抗体对肿瘤杀伤作用的报道。因此我们制备了抗人DR5多克隆抗体,初步研究了人DR5多抗诱导肝癌细胞系凋亡的效果。本文采用RT-PCR方法从人肝癌细胞HepG2中成功克隆出人DR5胞外区域（eDR5）,构建重组克隆载体pMD-eDR5测序鉴定正确后构建三种原核重组表达载体pET-Trx-eDR5（P1P2）,pGEX-eDR5（P1P2）和pET-26b（+）-eDR5（P3P4）并经IPTG诱导在大肠杆菌中获得不同程度表达。我们选用了具有较高表达量且广泛用于表达重组蛋白的pGEX-eDR5（P1P2）重组表达载体,做进一步的研究。经Western blot鉴定,pGEX-eDR5证实所表达的融合蛋白是GST-eDR5。然后采用亲和层析法分离纯化融合蛋白GST-eDR5,再通过切胶、透析获得高纯度的融合蛋白GST-eDR5。用高纯度的免疫原（GST-eDR5）,免疫小鼠制备了抗人DR5多克隆抗体,并用GST蛋白纯化抗血清。纯化后的抗血清不再识别GST蛋白,但仍能识别HepG2细胞中的DR5蛋白和GST-eDR5融合蛋白。此血清纯化方案尚未见报道。通过Western blot、ELISA方法鉴定抗血清特异性和效价,获得高特异性,效价高达1:25600的抗DR5多克隆抗体。用制备好的抗人DR5多克隆抗体处理肝癌细胞HepG2和正常细胞,发现HepG2细胞在形态上有明显的变化,而正常细胞形态无明显变化。MTT法检测结果显示抗血清处理后的HepG2生长受到明显抑制。进一步用TUNEL法、Caspase 3的Western blot检测细胞凋亡,未获得明确的实验结果,有待于进一步实验。