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目的探讨青蒿素对过氧化氢诱导的视网膜色素上皮层细胞(ARPE-19)氧化应激损伤的抑制作用。方法将ARPE-19细胞接种于96孔板,每孔7×10~3个细胞,细胞贴壁后分别加入不同浓度青蒿素,每组浓度做5个平行复孔,筛选对细胞增殖有效的最佳药物浓度。将APRE-19细胞分成四组,对照组:不做特殊处理;过氧化氢组:应用终浓度为100μmol/L的过氧化氢处理细胞24 h;青蒿素组:应用青蒿素30μmol/L,处理细胞24 h;青蒿素预保护组:应用30μmol/L青蒿素处理细胞24 h后加入终浓度为100μmol/L的过氧化氢处理24 h。利用MTT法检测青蒿素对过氧化氢诱导ARPE-19细胞损伤后的细胞增殖率;检测各组细胞内超氧化物歧化酶(SOD)含量和活性氧(ROS)阳性细胞数;通过Hoechst33342染色法及JC-1检测细胞线粒体膜电位观测各组细胞凋亡情况;Western Blot法检测各组细胞内凋亡标志蛋白Caspase-3、PARP及Bcl-2相对表达量;检测抗氧化应激通路Nrf2/HO-1/Keap1中Nrf2、HO-1、Keap1蛋白相对表达量。结果1、MTT法检测发现青蒿素浓度在30μmol/L对ARPE-19细胞增殖作用最强(均为P<0.01)。青蒿素预保护组与过氧化氢组相比,细胞增殖率升高,凋亡细胞数显著减少,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。2、青蒿素组ARPE-19细胞SOD含量显著增加(P<0.05);与过氧化氢组相比,青蒿素预保护组细胞内SOD含量明显增高(P<0.05),说明青蒿素能增加细胞内抗氧化物质,减少细胞凋亡。与对照组相比青蒿素组ROS阳性细胞减少(P<0.05);与过氧化氢组相比,青蒿素预保护组ROS阳性细胞亦明显减少(P<0.05),说明青蒿素可减少过氧化氢诱导细胞内活性氧物质积聚。3、Hoechst33342染色中,青蒿素预保护组与过氧化氢组相比ARPE-19细胞凋亡数量减少;JC-1法检测线粒体膜电位,荧光染色显示青蒿素预保护组与过氧化氢组相比绿色荧光减少,红色荧光增多,说明青蒿素减少细胞线粒体膜电位的缺失,使凋亡细胞数减少。Western Blot检测发现,青蒿素能促进ARPE-19细胞内AKT的磷酸化表达,青蒿素预保护组与过氧化氢组相比细胞内活化的Caspase-3、PARP表达量降低,Bcl-2表达增高。差异有统计学意义(均为P<0.05)4、Western Blot检测抗氧化应激通路Nrf2/HO-1/Keap1,青蒿素预保护组与过氧化氢组相比ARPE-19细胞内Nrf2、HO-1相对表达升高,Keap1相对表达降低。差异有统计学意义(P<0.05)。结论1、青蒿素能促进ARPE-19细胞增殖,增加ARPE-19细胞内抗氧化物酶SOD的含量,减少氧化应激导致的细胞内活性氧物质聚集,从而减少过氧化氢诱导ARPE-19细胞凋亡。2、青蒿素可以降低Caspase-3、PARP的表达,减少过氧化氢诱导ARPE-19细胞凋亡;促进抗氧化应激Nrf2/HO-1/Keap1通路中抗氧化应激分子Nrf2及其下游靶分子HO-1表达,抑制过氧化氢诱导ARPE-19细胞氧化应激损伤。