【摘 要】
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该文研究以矮牵牛(Petunia hybrida)种内7个品种为材料,研究矮牵牛原生质体培养和非对称体细胞杂交,研究内容包括原生质体培养和分化培养基的成分、融合前原生质体失活处理、
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该文研究以矮牵牛(Petunia hybrida)种内7个品种为材料,研究矮牵牛原生质体培养和非对称体细胞杂交,研究内容包括原生质体培养和分化培养基的成分、融合前原生质体失活处理、融合方法等对融合的原生质体的培养和再生的影响.结果表明叶肉原竽质体培养6个品种中有5个品种能在附加NAA 2mg/L和6BA 0.5mg/L的MS培养基或Modified MS培养基ⅰNH<,4>NO<,3>和FeEDTA减至7mmol/L和10μmol/Lⅱ,IAA0.2mg/L和6BA 0.5mg/L形成细胞团,分裂率超过50%.细胞团在含玉米素1mg/L MS培养基分化苗.小苗移至无激素或含有NAA 0.1mg/L的MS培养基生根.Rosy morn,星条,Snow Storm3个品种获得再生植株.二倍体花瓣原生质体持续分裂和形成愈伤组织非常困难,虽然有5个品种原生质体可以分裂,只有Burger品种分裂率达29%,其余分裂率极低(<6%).4个品种的细胞团转至增殖和再生培养基,经20周多次转移培养,但只有Burger品种再生2株幼苗.该研究对盖玻片、离心管和滤膜3种融合方法进行比较.游离的原生质体先进行钝化处理,两个品种的原生质体,一个用X-照射钝化,另一个用IOA钝化,然后融合和培养.经钝化处理后核和胞质成分之间代谢互补,只有细胞杂种能生存和形成细胞团.这种方法取得的细胞杂种是由原生质体非对称融合形成的.X-照射的剂量是30KV,3mA,15-45min.而IOA使用浓度是1mmol,5-10min.使用PEG甘油(8:0.5)的融合剂诱导融合,在三种方法中只有滤膜融合法获得细胞团.获得非对称融合再生苗的共有三个结合,这些组合是星条的花瓣原生质体与Snow Storm的叶肉原生质体,Snow Storm与星条叶肉原生质体、Snow Storm与玫瑰红白圈叶肉原生质体.杂种植株染色体数目有变异,小苗移栽后花不发育,两个月后不开花,表现为高度不育.
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