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目的:本研究主要目的是为了明确车前草在肠道中降尿酸的作用,进而研究其作用机制以及主要的有效成分,为医治高尿酸血症提供新的方向。研究方法:车前草的提取工艺及其优化:在85摄氏度的水浴条件下用10倍药材量的70%的乙醇水浴回流,1h/次,共回流2次,回流后用纱布过滤取滤液,将两次的滤液集中在一起;将滤液旋蒸成浸膏,用蒸馏水来溶解浸膏后配制成100mL的水溶液;对水溶液先用石油醚萃取,萃取两次,每次100mL,将两次萃取的石油醚溶液收集在一起后回收重复利用;再将水层溶液用乙酸乙酯萃取两次,每次100mL,收集两次萃取的乙酸乙酯层的溶液,水层溶液再用正丁醇萃取两次,每次100mL,收集两次萃取的正丁醇层的溶液,分别将正丁醇层以及乙酸乙酯层的溶液旋蒸成浸膏,再用甲醇溶液溶解后水浴挥干,烘干。对其提取时间、溶剂浓度、溶剂用量以及提取次数进行条件优化然后正交实验出最佳提取工艺。构建高尿酸血症的细胞模型:本实验先用不同浓度的酒精去刺激IEC-6细胞,再用液相检测细胞上清液中尿酸的含量,筛选出最佳的造模浓度和孵育时间以达到最佳的造模条件。车前草的药效及其作用机制的研究:将车前草按照优化后的提取工艺提取分离后的乙酸乙酯层和正丁醇层的提取物用甲醇溶液溶解并配制成实验所需浓度的溶液,水层溶液用旋蒸浓缩,再稀释到实验所需浓度备用,将细胞铺板孵育48h后,弃去旧培养基加入混有车前草溶液的培养基孵育24h,在加入含有尿酸的培养基孵育24h,收集细胞上清液用于检测尿酸含量以及黄嘌呤氧化酶的活性。研究结果:第一部分:用液相检测其芦丁的含量,单因素考察结果分别为取时间为2h时,提取次数为2次,乙醇浓度为60%,乙醇用量是药材的10倍,其芦丁的提取量最高,正交实验结果为提取时间为1.5h,提取次数为3次,乙醇浓度为60%,乙醇用量为10倍时为最佳工艺且在提取次数上有显著性的差异(p<0.05)。第二部分:用不同浓度的酒精刺激细胞,再用液相检测细胞上清液中的尿酸含量,得到在酒精浓度为2%、4%、8%、32%时,随着酒精浓度的升高,尿酸的含量呈现下降趋势,而随着孵育时间的延长尿酸的含量升高,考虑酒精浓度趋势的选择不合适,重新选择酒精浓度为1%、3%、9%、27%时,尿酸含量随着酒精浓度的升高出现先上升后下降的趋势在酒精含量为3%的时候出现最值,而尿酸含量随着时间的增加而下降,所以最佳的造模条件为用3%的酒精浓度孵育24h。第三部分:车前草的药效及机制研究,发现车前草的在肠道中有很好的降尿酸效果,且有一定的剂量关系,并且可以确定芦丁是车前草中一个重要的降尿酸成分,车前草中主要的降尿酸成分是黄酮类成分,主要存在乙酸乙酯层和正丁醇层,水层溶液也含有可降尿酸的有效成分,车前草在肠道对XOD有明显的抑制作用,但不是其全部的作用机制,还可通过其它途径参与调节尿酸的浓度。结论:经过本文实验,可以得出以下结论:1.车前草的最佳提取工艺为在水浴温度为85摄氏度的条件下,用10倍药材量的60%的乙醇回流提取3次、1.5h//次。2.酒精可刺激细胞生成尿酸,其最佳的造模条件为用含有酒精浓度3%的培养基孵育24h。3.车前草的在肠道中有很好的降尿酸效果,且有一定的剂量关系,并且可以确定芦丁是车前草中一个重要的降尿酸成分,而车前草中主要的降尿酸成分是黄酮类成分,主要存在乙酸乙酯层和正丁醇层,水层溶液也含有可降尿酸的有效成分,车前草在肠道对XOD有明显的抑制作用,但不是其全部的作用机制,还可通过其它途径参与调节尿酸的浓度。