【摘 要】
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目的:探索当归-白芍药对关键组分配伍治疗类风湿关节炎的作用机制。 方法:利用polysearch文本挖掘工具，查找当归与白芍所共同治疗的相关疾病，并采用cytoscape软件进行可视化
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目的:探索当归-白芍药对关键组分配伍治疗类风湿关节炎的作用机制。 方法:利用polysearch文本挖掘工具，查找当归与白芍所共同治疗的相关疾病，并采用cytoscape软件进行可视化;基于中药化学数据库，利用ROCs软件，对当归-白芍药对的有效成分进行逐一分析，得到当归-白芍药对的关键组分;然后，利用生物信息学分子网络分析方法，对药对关键组分进行基因本位论分析，预测得到其作用的分子机制。基于其预测结果，再通过体内外实验进行验证。体外实验方法如下:用白茅苷与β-谷甾醇预处理由U937细胞诱导的巨噬细胞，再予LPS孵育后，收集细胞上清液;采用ELISA检测上清中IL-1β、IL-6、TNF-α等细胞因子的表达水平;用上述药物预处理MH7A细胞，收集细胞，通过流式细胞检测技术来检测细胞凋亡情况。体内实验方法如下:利用胶原诱导关节炎大鼠模型以进行药物实验观察，造模成功后以腹腔注射给药，每3-4天记录一次实验大鼠的关节炎评分指数，药物干预14天后取材，检测血液生化指标谷丙转氨酶、谷草转氨酶、肌酐、尿素氮水平; HE染色法评估各组大鼠踝关节、肝、肾的病理变化情况;ELISA法检测血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-17等细胞因子的表达水平;免疫组化法检测NF-κ B通路的关键蛋白P50、P65水平。 结果:①当归-白芍药对对类风湿关节炎有一定的干预作用;②当归-白芍药对的关键组分为白茅苷和β-谷甾醇;③预测发现:白茅苷和β-谷甾醇配伍的主要生物学功能包括影响细胞凋亡和内环境稳态，调控NF-κB通路等。④体外实验证实:白茅苷和β-谷甾醇组分配伍可以抑制细胞分泌IL-1β、IL-6、TNF-α等因子的表达水平(P＜0.05)，并且促进细胞凋亡;⑤体内实验证实:组分配伍组大鼠于干预后第27天的关节炎评分明显较其余各组低(P＜0.05)，IL-6、TNF-α水平显著低于较单独用药(P＜0.05);关节HE染色结果显示，与模型组比较，组分配伍组炎性细胞浸润和骨破坏较轻;免疫组化结果提示，组分配伍对P50和P65表达具有抑制作用，未见明显肝肾毒性。 结论:当归-白芍药对为治疗类风湿关节炎的常用药对;白茅苷和β-谷甾醇是该药对治疗类风湿关节炎的关键组分;白茅苷和β-谷甾醇配伍通过纠正IL-1β、IL-6等细胞因子的表达及调控NF-κB细胞通路发挥作用。
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