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防御素(Defensins)是由上皮细胞和免疫细胞产生的多功能两亲性阳离子抗微生物肽(Antimicrobial peptides,AMPs),具有广泛的抗细菌、真菌和病毒活性,对黏膜上皮有保护作用。绵羊β-防御素-1(Sheep β-defensin-l,sBD-1)是主要表达在绵羊气管和整个消化道的防御素。前期研究显示酿酒酵母菌能够诱导绵羊瘤胃上皮细胞(Ovine ruminal epithelial cells,ORECs)及绵羊瘤胃外植体(Ovine ruminal explants,OREs)sBD-1表达增加。但酿酒酵母培养物和提取物对ORECs sBD-1表达的影响却未有报道。本研究以体外培养的ORECs为试验对象,利用MTT法检测浓度在0～400μg/mL酿酒酵母培养物和提取物都对ORECs没有细胞毒性作用后进行刺激试验。首先分别用200 μg/mL酿酒酵母培养物和提取物诱导ORECs 0、6、12、18、24和30 h后,通过荧光定量 PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测 sBD-1 mRNA 相对表达量;然后用不同浓度梯度(0、100、200、300、400 μg/mL)酿酒酵母培养物和提取物分别诱导ORECs最佳时间后,同样采用qPCR检测sBD-1 mRNA表达量。最后比较两者诱导ORECs sBD-1 mRNA表达效果。结果显示,酿酒酵母培养物和提取物均可诱导ORECs sBD-1 mRNA表达。当酿酒酵母培养物浓度为400 μg/mL、酿酒酵母提取物浓度为200 μg/mL分别刺激ORECs 6 h时,ORECs sBD-1 mRNA表达量达到最高;而且酿酒酵母提取物诱导效果优于酿酒酵母培养物。选用诱导效果较好的酿酒酵母提取物,通过qPCR技术对其诱导sBD-1表达信号通路进行初步研究。结果显示与未刺激相比,酿酒酵母提取物刺激过的ORECs内的TLR-2、MyD88 和 MAPKs(p38、JNK 和 ERK1/2)mRNA 相对表达量都上调,而NF-KB mRNA相对表达量无明显变化。然后分别阻断p38、JNK和ERK1/2途径,检测其对酿酒酵母提取物诱导sBD-1 mRNA表达的影响。结果显示sBD-1 mRNA相对表达量显著降低。综上,本研究表明TLR-2、MyD88和MAPKs参与调节酿酒酵母提取物诱导ORECs sBD-1基因表达的过程。