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[研究背景] 在肿瘤免疫的现有研究中，肿瘤相关B细胞的作用存在较大争议。然而，出现在肿瘤局部由多种淋巴细胞（以B细胞为主）有序构成的类似淋巴结的组织——三级淋巴样结构(tertiary lymphoid structure，TLS)在现有报道中均与肿瘤的较好预后相关。因此，TLS相关B细胞是研究肿瘤微环境中B细胞的重要切入点。根据文献报道，新辅助化疗后乳腺癌局部的TLS明显增多，说明化疗后的B细胞功能很可能发生了改变。 [研究目的] 本课题围绕化疗后乳腺癌相关B细胞的表型与功能相关若干问题，集中研究在动物模型及体外模型总，化疗后B细胞的功能改变和机制，探讨针对化疗后B细胞作为节点分子逆转乳腺癌免疫逃逸和增强治疗效果的新疗法。 [研究方法] 1.通过磁珠和流式分选乳腺癌病人的外周血及乳腺癌组织浸润的肿瘤特异淋巴细胞，分析其表型和功能。 2.建立体外诱导肿瘤相关B细胞的模型，分析诱导期间B细胞的表型改变及功能;并通过高通量表达谱芯片找出其中关键的信号通路。 3.在B细胞缺陷小鼠身上建立移植瘤模型，通过化疗等手段处理小鼠，观察肿瘤大小的改变。 4.通过免疫组化和免疫荧光检测乳腺癌相关B细胞的表型，与病人的临床病理特征及预后做相关分析，并在网上数据库中进行验证。 [结果] 通过分析本中心临床资料发现，接受过术前化疗的患者标本中B细胞与无病生存时间显著相关(p=0.032，HR=0.370(95％CI，0.177～0.711))，未接受术前化疗组中B细胞与DFS没有显著相关性(p=0.590);癌组织中存在TLS的比例(36％)明显高于未化疗者(14％)，且有TLS病例的化疗反应优于无TLS者。在此基础上，我们建立了B细胞与肿瘤细胞的体外共培养模型和B细胞基因敲除鼠的移植瘤模型，并初步证实化疗处理后的乳腺癌细胞能够诱导B细胞活化，并进一步激活T细胞和DC。 [结论] 我们的结果说明化疗后乳腺癌局部补体的激活，介导了B细胞表型改变，进而激活T细胞抗肿瘤免疫功能。本课题有助于明确B细胞在乳腺癌发展中的作用，为化疗改变肿瘤免疫微环境的科学发现提供新的理论依据，推动乳腺癌诊疗手段的优化和革新。