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目的:本研究基于16S高通量测序技术和液相色谱-质谱代谢组学技术,以肠道微生物及小分子代谢物为切入点,以脾虚血脂异常人群作为研究对象,将代谢组学与肠道微生物进行联合,阐明香砂六君子汤防治脾虚血脂异常的疗效机制,为中医“从脾论治”心脑血管疾病提供科学依据。材料与方法:本研究纳入2018年8月到2018年10月就诊于沈阳医学院附属第二医院的门诊脾虚血脂异常人群50例,同时纳入健康志愿者30例,脾虚血脂异常人群以香砂六君子汤治疗,疗程4周。检测三组受试者的血清血脂水平;采用随机数字表法从健康人群、脾虚血脂异常人群治疗前及相应的脾虚血脂异常人群治疗后中分别抽取15例受试者(脾虚血脂异常人群治疗前及脾虚血脂异常人群治疗后为同一人群),应用LC-MS代谢组学技术检测三组受试者粪便标本中的代谢产物,分析肠道内代谢物的差异;同时采用16S r DNA高通量测序技术(委托北京奥维森基因科技有限公司)检测三组受试者粪便标本中的肠道菌群,分析肠道内微生物菌群多样性与丰度及不同组别受试者的差异菌群。结果:1.三组受试者血脂水平检测结果本次研究共计纳入脾虚血脂异常人群50例,剔除1例,健康人群30例。脾虚血脂异常人群治疗前与健康人群血清血脂水平比较,血清TC、TG、LDL-C水平显著升高,血清HDL-C水平显著降低(P<0.05);脾虚血脂异常人群治疗后与脾虚血脂异常人群治疗前相比较,血清TC、TG、LDL-C水平显著降低,血清HDL-C水平显著升高(P<0.05)。2.三组受试者代谢组学检测结果健康人群与脾虚血脂异常人群治疗前、脾虚血脂异常人群治疗前与脾虚血脂异常人群治疗后之间存在差异性代谢产物,取交集后发现两组对比后共同改变的代谢产物有7个,分别为Benzoic acid(苯甲酸),(S)-Naproxen(S-萘普生),Eicosapentaenoic Acid(二十碳五烯酸),Dihomo-gamma-Linolenic Acid(二高γ-亚麻酸),11(Z),14(Z)-Eicosadienoic Acid(11(Z),14(Z)-二十碳二烯酸),Adrenic Acid(肾上腺酸),Xanthine(黄嘌呤)。3.三组受试者肠道菌群检测结果(1)操作分类单元(OTU)聚类结果:三组45个样本共产生637个OTU,健康人群每个样本平均145个OTU,脾虚血脂异常人群治疗前每个样本平均144个OTU,治疗后每个样本平均152个OTU,相比于治疗前有所提升。(2)肠道菌群Alpha多样性分析:稀释性曲线、Shannon-Wiener曲线、Specaccum曲线均提示本次研究样本量充足,测序数据量合理。脾虚血脂异常人群治疗前与健康人群相比较,chao1、observed species及shannon指数均降低;脾虚血脂异常人群治疗后与脾虚血脂异常人群治疗前相比较,chao1、observed species、PD whole tree及shannon指数均升高。(3)物种组成分析:在门水平,脾虚血脂异常人群治疗前与健康人群相比,厚壁菌门、放线菌门占比降低,拟杆菌门、变形菌门占比升高;脾虚血脂异常人群治疗后与脾虚血脂异常人群治疗前相比,厚壁菌门、放线菌门、拟杆菌门占比升高,变形菌门占比降低;F/B比值明显降低。在属水平,相较于健康人群,脾虚血脂异常人群治疗前布劳特氏菌属、粪杆菌属、双歧杆菌属占比降低而直肠真杆菌属、克雷伯氏菌属、大肠-志贺氏杆菌属、巨单胞菌属占比则升高;相较于脾虚血脂异常人群治疗前,脾虚血脂异常人群治疗后粪杆菌属、双歧杆菌属、拟杆菌属占比提升,而布劳特氏菌属、直肠真杆菌属、克雷伯氏菌属、大肠-志贺氏杆菌属、巨单胞菌属占比则有所下降。(4)β多样性分析:健康人群与脾虚血脂异常人群治疗前肠道菌群PCA图中距离较远,脾虚血脂异常人群治疗后距离脾虚血脂异常人群治疗前较远,而距离健康人群则较近,脾虚血脂异常人群治疗后与健康人群微生物差异较小;健康人群与脾虚血脂异常人群治疗后矩阵距离较近,相似度较高,Beta多样性呈现差异度减少趋势;而脾虚血脂异常人群治疗前与健康人群、脾虚血脂异常人群治疗后比较,矩阵距离较远,呈现Beta多样性显著差异。(5)肠道菌群差异性分析:三组样本的差异性菌群有25类,其中属于厚壁菌门的11类,变形菌门的3类,放线菌门的2类及Candidatus_Saccharimonas、Selenonmonadales、Negativicutes、Acidaminococcaceae。健康人群重要的差异菌群为棒杆菌科、明串珠菌科、链球菌科、乳杆菌目、芽孢杆菌纲;脾虚血脂异常人群治疗前重要的差异菌群为Selenonmonadales、Negativicutes、肠杆菌科、肠杆菌目;脾虚血脂异常人群治疗后重要的差异菌群为Acidaminococcaceae、变形菌纲。结论:1.香砂六君子汤可以改善脾虚血脂异常人群血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平。2.香砂六君子汤能够提升脾虚血脂异常人群肠道菌群的物种丰度与多样性及调节脂肪酸合成,胆固醇代谢的相关代谢产物水平,起到纠正血脂紊乱的作用。