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目的：
糖尿病状态下心肌即可发生纤维化,加之急性心肌梗死后,心脏发生心室重构程度更加严重,如何减少心肌梗死周围缺血区心肌纤维化的生成,是减轻心室重构的重要措施。本试验通过观察重组人促红细胞生成素(EPO)对糖尿病兔心肌梗死后间质重塑的影响,并探讨促红细胞生成素对心脏保护作用的机制。
方法：
40只健康日本大耳兔禁食12小时,经耳缘静脉采用两次法注射四氧嘧啶(ALX),按50mg/kg,间隔1周后再按100mg/kg注射ALX,注射后即刻50％葡萄糖5ml灌胃,采用葡萄糖氧化酶法测末次给药后检测24h,72h的空腹耳缘静脉血血糖值,以至少一次空腹血糖≥16.7mmol/L建模成功。
糖尿病模型成模并饲养一月存活30只,按随机数字法分为:
(1)假手术组A；
9只糖尿病兔前降支穿线不结扎,给予1ml/Kg生理盐水耳缘静脉注射,3天后再次注射相同剂量。
(2)手术对照组B；
11只糖尿病兔心梗模型建立后,给予1ml/Kg生理盐水耳缘静脉注射,3天后再次注射相同剂量。
(3)手术用药组C；
10只糖尿病兔心梗模型建立后,给予1ml/Kg生理盐水稀释的EPO耳缘静脉注射稀释浓度1000U/ml),3天后再次注射相同剂量。
TTC染色检测心肌梗死面积的变化,并图像分析统计心肌梗死范围所占面积;
HE染色观察光镜下心肌梗死情况及梗死范围的变化;
Masson染色观察梗死周围心肌纤维化情况,光镜下图像分析计算纤维所占视野容积分数;
免疫组织化学染色半定量分析心肌组织中MMP-9及Timap-1蛋白的表达变化。
结果：
糖尿病模型成功33只,观察期间死亡3只,30只进入心梗模型建立阶段,心肌梗死后一个月3组共存活22只,A组7只;B组7只;C组8只,进入数据统计。
TTC染色下EPO干预组心肌梗死面积明显小于对照组(P＜0.05)。
手术干预组HE染色下可见心肌梗死区纤维增生颜色发白,肌纤维排列紊乱,存在空泡变性,EPO干预组红色心肌纤维排列规律,有较少胶原纤维渗出。
Masson染色下缺血边缘区,纤维增生C组明显低于B组(P＜0.05)。
免疫组织化学染色MMP-9积分光密度值(IOD)C组明显低于B组(P＜0.05);
免疫组织化学染色Timp-1积分光密度值(IOD)B组与C组无明显差别(P＞0.05)。
结论：
EPO可减少糖尿病合并心肌梗死之后的梗死面积,并进一步减轻非梗死区心肌纤维化,从而使心肌顺应性增加,可能与MMP-9表达减少有关,而与Timp-1表达无关。