电针调节Noggin表达对VD大鼠学习记忆过程中海马神经发生的影响

• 作 者: 魏居瑞
• 机 构: 浙江中医药大学
• 出 处: 浙江中医药大学
• 发表日期: 2008年期
• 关键词: 电针疗法 血管性痴呆 Noggin表达 海马神经 学习记忆

目的：通过电针督脉百会、大椎从调节脑与神经发育密切相关的神经诱导因子Noggin基因的表达入手，在不同时相观察电针治疗时海马Noggin mRNA表达及神经干细胞（NSC）增殖、分化，结合学习记忆的神经行为学观察，探讨电针通过Noggin对VD模型大鼠的海马神经发生影响机制及神经诱导因子Noggin、神经干细胞（NSC）增殖、分化对学习记忆的影响机制，为电针治疗VD提供理论依据。　　方法：对健康的SD雄性大鼠采用改良2-VO法造成VD模型，随机分为1W、2W、4W、6W模型及电针组，BrdU腹腔注射标记海马分裂细胞；采用针刺督脉腧穴百会、大椎，使用韩氏电针治疗仪予15Hz连续波、1mA输出电流，治疗20min；利用 Morris水迷宫观察空间学习能力和记忆能力的变化情况；采用 RT－PCR、HE染色及BrdU免疫组织化学法及BrdU、NeuN、GFAP免疫荧光双标染色法分别观察 Noggin基因的表达、海马神经组织形态学变化及海马齿状回（DG）神经发生的规律及电针治疗后上述指标的变化情况。　　结果：(1)行为学检测：电针组大鼠在第2、4、6周逃避潜伏期值均明显高于模型组大鼠（P＜0.05或P＜0.01）；电针组大鼠之间平台象限游泳时间没有明显差异，但与同时相模型组相比有差异（P＜0.05或P＜0.01）。　　(2)电针对VD模型大鼠海马Noggin基因表达的影响：通过RT－PCR半定量检测神经诱导因子Noggin mRNA含量发现在不同时期海马均有Noggin基因表达，在造模初期较高，但随着造模后时间的延长各组Noggin mRNA表达减少，同时相的电针组与模型组相比有差异（P＜0.05或P＜0.01）。　　(3)海马组织形态学变化：通过对海马组织进行HE染色后观察细胞形态发现，电针组大鼠海马齿状回区较模型组结构紧密，排列整齐，层次丰富，且电针组海马神经细胞形态较模型组好。　　(4) NSC的增殖情况：电针组大鼠海马齿状回颗粒下层的BrdU阳性细胞多于同时相的模型组,但不管是电针组还是模型组随着缺血时间的延长BrdU阳性细胞减少（P＜0.05），在第4、6周组差异更为显著（P＜0.01）。　　(5) NSC分化情况：缺血2周后，海马GCL有细胞出现BrdU＋NeuN及BrdU＋GFAP双阳性表达，电针组分化为神经元数量多于模型组(P＜0.05)，分化的胶质细胞数量多于分化为神经元的细胞量,但分化为胶质细胞量模型组与电针组无显著性差异。　　结论：⑴电针能够改善VD模型大鼠空间学习能力和记忆能力；　　⑵电针能改善VD大鼠海马组织形态学损伤；　　⑶电针能够促进VD模型大鼠海马Noggin的表达，并可促使海马神经干细胞的增殖，随着治疗时间的延长可促使其分化；　　⑷Noggin的表达与神经干细胞的增殖呈正相关性，电针可使这一效应加强；　　⑸电针通过调节Noggin的表达促进神经干细胞增殖和分化可能是电针治疗VD的机制之一。