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胰腺癌(Pancreatic Carcinoma, PC)是一种恶性程度极高的消化道肿瘤，由于其发生部位特殊，位于腹部深处、发病隐匿，确诊时常常晚期；再加上其生物学特性具有易发生局部浸润（如侵犯周边血管、淋巴结、神经等）和远处转移的特点，胰腺癌已经越来越成为困扰人类健康甚至威胁生命的杀手。近年来胰腺癌发病率与死亡率逐年增高，怎样提高早期诊断与有效治疗越来越成为临床研究的重点。近几年，随着免疫学的不断发展，一些肿瘤学家开始把免疫疗法作为治疗癌症的新方法。其中CD4-CD8-T（double negative T cell, DNT）细胞作为一种特殊的调节性T细胞，在正常人的外周血约占总淋巴细胞含量的1-5%，该细胞表面表达Fas/FasL、TNF/TNFR，CD3+、CD4-、CD8-、MHCⅠ等表型。研究表明DNT细胞在免疫调节、免疫抑制、自身免疫及抗肿瘤方面发挥重要作用。本研究通过从人外周血中分离、扩增DNT细胞，使用流式细胞仪实验方法定性，利用MTT及裸鼠动物实验从体内、体外两方面验证DNT细胞对人胰腺癌细胞的抑制作用；同时通过PCR技术，探索DNT细胞抑制肿瘤细胞生长的作用机制，为利用免疫学手段治疗胰腺癌奠定基础。目的探讨CD4-CD8-double negative T（DNT）细胞对体内、外胰腺癌生长的抑制效应及其作用机制，为利用免疫学手段治疗胰腺癌提供理论实验依据。方法利用抗体吸附法从人外周血分离、扩增、培养DNT细胞。采用四甲基偶氮唑盐法检测DNT细胞对人胰腺癌细胞株Panc-1生长的影响。将18只裸鼠随机分成3组，其中前两组皮下注射Panc-1细胞以建立荷瘤鼠人胰腺癌皮下移植瘤模型，第3组注射DNT与Panc-1细胞按数量5:1共培养后的混细胞悬液。前两组待成瘤后，再随机分为对照组和治疗组。对照组每日给予等量蒸馏水口服，治疗组予塞来昔布4mg/d口服。每2周测量裸鼠肿瘤体积一次，描绘肿瘤生长曲线。治疗结束后处死裸鼠，剥除瘤组织，测量肿瘤体积并计算抑瘤率。通过PCR途径检测DNT细胞作用于胰腺癌细胞后，胰腺癌细胞表面Fas/FasL基因的变化。结果（1）四甲基偶氮唑盐结果显示：DNT细胞能在体外抑制人胰腺癌细胞株Panc-1的生长，且DNT细胞对胰腺癌细胞的生长抑制呈剂量依赖性；（2）DNT细胞能够干预人胰腺癌裸鼠皮下移植瘤的生长；（3）PCR结果显示：Fas基因表达上调、FasL基因表达下调。结论DNT细胞能够抑制体内、外胰腺癌细胞的生长；DNT细胞可能通过Fas/FasL介导的信号传导通路发挥其抗肿瘤细胞生长的作用，为进一步实现肿瘤过继免疫治疗提供了实验新思路。