脾切除对肝纤维化大鼠肝脏TGFβ1的表达及血清TGFβ1水平的影响

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目的:TGFβ1是促进肝纤维化发展的重要因子之一。本课题研究脾切除对肝纤维化大鼠肝脏TGFβ1的表达和血清TGFβ1水平的影响,从而探讨脾切除在肝纤维化中的作用。方法:对大鼠皮下注射CCL4,建立50例肝纤维化大鼠模型。于建模3周,6周,及8周分别取大鼠肝脏和脾脏标本。用免疫组化SP方法测定其TGFβ1的表达,HE和姬姆萨染色检测肝纤维化。应用双抗体夹心ELISA方法测定15例模型大鼠行脾脏切除前后的血清TGFβ1水平,以及15例对照组大鼠的血清TGFβ1水平,并于术后4周取两组大鼠的肝脏标本,用免疫组化SP方法测定其TGFβ1的表达。应用CMIAS8彩色图像系统对阳性目标进行分析和处理。结果:(1)TGFβ1主要位于肝非实质细胞胞浆内,这些细胞分布在汇管区、纤维间隔、炎症区,少数在肝窦内。纤维组织中有少量TGFβ1存在,少数肝细胞胞浆内也有TGFβ1存在。正常肝组织有少量TGFβ1表达。大鼠肝纤维化模型的肝脏各个时期TGFβ1的积分光密度(IOD)值分别为:正常时(26.81±5.42),造模3周时(80.21±10.98),造模6周时(134.60±12.12),造模8周时(204.60±15.76)。结果显示,随着肝纤维化的进展,肝脏TGFβ1的表达也随之增加(P<0.01)。(2)在肝纤维化中,TGFβ1主要位于脾脏的非实质细胞胞浆内,在纤维组织中也有少量TGFβ1存在,而在正常脾脏组织的视野内也有较少的表达。大鼠肝纤维化模型的脾脏各个时期TGFβ1的IOD值分别为:正常时(22.40±4.76),造模3周时(59.96±10.17),造模6周时(98.81±7.40),造模8周时(180.46±11.03)。结果显示,随着肝纤维化的进展,脾脏TGFβ1的表达也随之增加(P<0.01)。(3)肝纤维化大鼠行脾脏切除术前,术后2周,术后4周其血清TGFβ1的水平分别为(pg/ml):380.565±35.826,394.149±36.297,417.087±31.785.而对照组大鼠其血清TGFβ1在同一时期的水平分别为(pg/ml):385.870±35.359,421.014±38.663,442.808±39.228。实验结果表明,行脾切除术组大鼠其血清TGF-β1的水平显著低于对照组大鼠(P<0.05)。(4)肝纤维化模型大鼠行脾切除术后4周,其肝脏TGFβ1的IOD值为224.35±9.45,对照组大鼠肝脏TGFβ1的IOD值为240.40±11.73。结果表明,行脾切除术组其肝脏TGFβ1的表达低于对照组大鼠(P<0.05)。结论:(1)随着肝纤维化程度的进展,大鼠肝脏和脾脏内TGFβ1表达也逐渐增加。(2)肝纤维化大鼠行脾切除术后其血清TGFβ1水平显著低于未手术组,而且行脾切除术后大鼠肝脏TGFβ1的表达也显著低于未手术组,推测脾切除术可能通过减少TGFβ1的产生,在一定程度上可延缓肝纤维化的发展。
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