艾灸治疗UC的临床疗效观察及对P2X7R/NF-κB通路的作用研究

来源 :上海中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:emily9999
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目的:  1.观察艾灸对缓解期、轻中度活动期溃疡性结肠炎患者的临床疗效,明确灸法对溃疡性结肠炎患者的治疗优势,为临床应用灸法治疗溃疡性结肠炎和提高临床疗效提供科学依据。  2.拟明确艾灸能通过影响P2X7R/NF-κB通路,调节结肠组织炎症细胞因子的表达,发挥抑制肠道炎症的作用,以达到治疗UC之目的。  方法:  1.临床研究:采用随机、对照试验设计方法。将轻、中度活动期和缓解期溃疡性结肠炎患者,按照随机数字表分为治疗组、对照组,治疗组予隔药灸治疗,对照组予隔麸灸治疗,2组均取天枢(双)、上巨虚(双),每次施灸2壮,隔日1次,治疗12周。疗程结束后,对2组患者进行临床有效率、临床症状积分、炎症性肠病问卷(IBDQ)、抑郁自评量表(SDS)、焦虑自评量表(SAS)比较,观察艾灸治疗UC患者的临床疗效。  2.动物实验研究:将雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、正常+隔药灸组、模型+隔药灸组,采用葡聚糖硫酸钠(DSS)循环给药法制备UC大鼠模型。模型+隔药灸组和正常+隔药灸组取天枢(双)、气海穴进行隔药灸干预;从大鼠一般情况、结肠病变肉眼评分、结肠组织病理学改变及评分,观察隔药灸干预UC的效应;采用ELISA检测各组大鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-1β的水平,采用免疫组化、Western blot、RT-qPCR的技术与方法,检测各组大鼠结肠组织中P2X7R、NF-κBp65的蛋白表达及免疫炎症相关因子IL-6、TNF-α、IL-10的表达水平。  结果:  1.临床研究  (1)总有效率评价结果:治疗结束后,隔药灸组总有效率与隔麸灸组总有效率相比,差异无统计学意义(P>0.05)。  (2)临床症状积分评价结果:与治疗前相比,隔药灸组和隔麸灸组患者治疗结束后腹痛、腹泻、粘液便、脓血便、腹胀、肠鸣、里急后重等单项临床症状积分以及临床症状总体积分均显著降低(P<0.05)。  (3) IBDQ评价结果:与治疗前相比,隔药灸组和隔麸灸组患者治疗结束后炎症性肠病问卷评分均显著升高(P<0.05)。  (4) SDS评价结果:与治疗前相比,隔药灸组和隔麸灸组患者治疗结束后SDS评分均显著降低(P<0.05)。  (5) SAS评价结果:与治疗前相比,隔药灸组和隔麸灸组患者治疗结束后SAS评分均显著降低(P<0.05)。  2.动物实验研究:  (1)各组大鼠结肠损伤肉眼评分比较:与正常组比较,模型组、模型+隔药灸组大鼠结肠损伤肉眼评分均显著升高,差异均有统计学意义(P均<0.01);与模型组比较,模型+隔药灸组、正常+隔药灸组大鼠结肠损伤肉眼评分均显著降低,差异均有统计学意义(P均<0.01)。  (2)各组大鼠结肠组织病理学评分比较:与正常组比较,模型组、模型+隔药灸组大鼠结肠组织病理学评分均显著升高,差异均有统计学意义(P均<0.01);与模型组比较,模型+隔药灸组、正常+隔药灸组大鼠结肠组织病理学评分均显著降低,差异均有统计学意义(P均<0.01)。  (3)隔药灸对大鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-1β水平的影响  IL-1β:与模型组比较,正常+隔药灸组大鼠血清IL-1β水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。  TNF-α:与正常组比较,模型组大鼠血清TNF-α水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.001);与模型组比较,正常+隔药灸组、模型+隔药灸组大鼠血清TNF-α水平均显著降低,差异均有统计学意义(P均<0.001)。  IL-6:与正常组比较,模型组大鼠血清IL-6水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.001);与模型组比较,正常+隔药灸组、模型+隔药灸组大鼠血清IL-6水平均显著降低,差异均有统计学意义(P均<0.01)。  (4)隔药灸对大鼠结肠组织TNF-α、IL-10 mRNA表达的影响  TNF-α mRNA:与正常组比较,模型组大鼠结肠组织TNF-α mRNA的表达显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,正常+隔药灸组大鼠结肠组织TNF-α mRNA的表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);  IL-10 mRNA:与模型组比较,模型+隔药灸组大鼠结肠组织IL-10 mRNA的表达显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。  (5)隔药灸对大鼠结肠组织P2X7R、NF-κBp65、TNF-α、IL-6蛋白表达的影响。  P2X7R:与正常组比较,模型组、模型+隔药灸组大鼠结肠组织P2X7R蛋白的表达均显著升高,差异均有统计学意义(P均<0.05);与模型组比较,正常+隔药灸组、模型+隔药灸组大鼠结肠组织P2X7R蛋白的表达均显著降低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。  NF-κBp65:与正常组比较,模型组大鼠结肠组织NF-κBp65蛋白的表达显著升高,差异有统计学意义(P<0.001);与模型组比较,正常+隔药灸组、模型+隔药灸组大鼠结肠组织NF-κBp65蛋白的表达均显著降低,差异均有统计学意义(P均<0.01)。  TNF-α:与正常组比较,模型组大鼠结肠组织TNF-α蛋白的表达显著升高,差异有统计学意义(P<0.001);与模型组比较,正常+隔药灸组、模型+隔药灸组大鼠结肠组织TNF-α蛋白的表达均显著降低,差异均有统计学意义(P均<0.001)。  IL-6:与正常组比较,模型组大鼠结肠组织IL-6蛋白的表达显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,正常+隔药灸组、模型+隔药灸组大鼠结肠组织IL-6蛋白的表达均显著降低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。  结论:  1.两种灸法(隔药灸和隔麸灸)均可以缓解溃疡性结肠炎患者临床症状,提高患者生活质量,改善患者焦虑抑郁状态。  2.隔药灸“天枢、气海”穴可改善UC大鼠的一般情况,改善结肠组织形态学变化,降低结肠组织病理学评分,缓解UC大鼠肠道炎症反应。  3.隔药灸“天枢、气海”穴可降低模型组结肠组织高表达的P2X7R蛋白水平,抑制NF-κBp65的活性,降低模型组IL-6、TNF-α血清水平,上调结肠组织IL-10 mRNA表达,发挥调节免疫平衡的作用。  4.隔药灸可能或部分是通过调控UC大鼠结肠组织P2X7R/NF-κB通路,调节免疫失衡状态,是隔药灸抑制UC肠道炎症的效应机制之一。
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