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研究显示影响肝癌复发最本质的因素是肝癌细胞的侵袭性。肝癌细胞高侵袭性造成的肝内播散、门静脉侵袭以及远处转移是导致肝癌病人预后不良的主要原因。生化领域研究表明cortactin(皮层肌动蛋白)通过磷酸化反应调节细胞运动并促进细胞迁移。肿瘤学研究证明,在细胞突触发生、肿瘤发生、肿瘤细胞侵袭性以及转移灶形成过程中cortactin都具有重要作用。虽然有证据表明反义皮层肌动蛋白基因抑制肝癌细胞穿膜游走,但目前国内外尚缺乏CTTN (cortactin gene,皮层肌动蛋白基因)与肝癌侵袭之间相关性的临床研究。因此,本研究以IHC (immunohistochemistry,免疫组织化学)和RT-FQ-PCR (real-time fluoresence quantitative polymerase chain reaction,实时荧光定量多聚酶链式反应)为主要方法对cortactin在肝癌中的表达情况进行测定,旨在证实CTTN高表达增强肝癌侵袭性。本研究使用IHC方法检测人肝癌组织中cortactin表达情况,收集整理临床病理参数,统计分析cortactin与肝癌侵袭性之间的相关性。提取人肝癌组织总RNA (ribonucleic acid,核糖核酸),RT-PCR (reverse transcription-polymerase chain reaction,逆转录多聚酶链式反应)扩增CTTN和GAPDH (glyceraldehyde phosphate dehydrogenase,磷酸甘油醛脱氢酶)基因片段并分别构建pMD18-T(+)/CTTN和pMD18-T(+)/GAPDH重组载体。建立RT-FQ-PCR双标准曲线法检测人肝癌组织CTTN基因表达水平的方法,并对该方法进行统计学评价。应用RT-FQ-PCR实际检测人肝癌组织CTTN基因mRNA(messenger ribonucleic acid,信使核糖核酸)表达水平,分析CTTN表达差异与肝癌侵袭性之间的关系。IHC结果显示,cortactin表达差异在肿瘤包膜完整性、TNM分期、门脉癌栓或肝外转移方面有统计学意义。肿瘤侵袭性与cortactin表达呈正相关。通过分子生物学技术我们成功构建pMD18-T(+)/CTTN和pMD18-T(+)/GAPDH重组载体,建立了双标准曲线法检测人肝癌组织CTTN基因表达水平的方法。CTTN和GAPDH基因模板拷贝数分别在1.6×103～1.6×107和1.6×104～1.6×107之间时标准曲线有良好线性关系,两基因组内变异和组间变异无显著差异。对人肝癌标本的检测结果表明,肝细胞癌高侵袭组CTTN表达明显高于低侵袭组和对照组。高侵袭组与低侵袭组、高侵袭组与对照组比较CTTN表达差异有统计学意义；低侵袭组与对照组比较CTTN表达差异无统计学意义。本研究结果证明：1.cortactin高表达与肝癌侵袭力之间成正相关,cortactin表达水平可以作为评价肝癌侵袭力的指标。2.成功建立RT-FQ-PCR检测人肝癌组织CTTN基因的方法,奠定了利用人肝癌组织研究CTTN基因表达水平的方法学基础。3.CTTN基因表达水平与肝癌的侵袭性有关,CTTN高表达增强肝癌的侵袭力。通过本研究为利用检测cortactin基因表达水平作为预测肝癌病人预后的一种方法开辟了道路,同时也为下一步深入探讨cortactin促进肝癌侵袭性的机制打下基础。