硫化氢对野百合碱诱导大鼠肺动脉高压作用的研究

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目的探讨H2S对野百合碱(MCT)诱导的肺动脉高压(PH)大鼠肺血管结构、肥大细胞以及IL-6的影响。方法1.24只SD大鼠按随机数字表法随机分为3组:(1)对照组;(2)MCT组;(3)MCT+H2S组,每组各8只。MCT组及MCT+H2S组第一天用MCT以60mg/kg计量单次腹腔注射,对照组给予相等量的0.9%氯化钠注射液腹腔注射;从注射MCT的当天,MCT+H2S组大鼠每天腹腔注射Na HS(56μmol/kg)1次,连续干预3周,对照组和MCT组每天给予腹腔注射相同剂量的0.9%氯化钠注射液1次,饲养3周,观测各组大鼠行为体征的改变。2.右心微导管法测定各组大鼠平均肺动脉压力(m PAP:mean pulmonary arterial press)。3.测定各组大鼠右心室肥厚指数4.HE染色观测各组大鼠肺组织标本血管壁的增厚状况、测量肺小血管中膜的厚度;甲苯胺蓝染色测定各组大鼠肺组织中肥大细胞的数量以及脱颗粒肥大细胞所占的比例。5.酶联免疫吸附试验检测各组大鼠血浆中IL-6的浓度;去蛋白分光光度法测定各组大鼠血浆中H2S的浓度。结果1.MCT注射建模3周后,MCT组大鼠出现皮毛枯槁、松毛、无光泽,活动减少,呼吸急促、肝肿大、饮食减少等表现。与对照组相比,平均肺动脉压力、右心室肥厚指数明显升高[(38.43±3.17)mm Hg vs(18.00±1.79)mm Hg,(0.4563±0.0390)vs(0.2394±0.0139),均P<0.05],说明肺动脉高压模型造模成功,而H2S能明显抑制m PAP增高及右心肥厚指数的增加。2.病理组织学HE染色显示:与对照组相比,MCT组肺小动脉血管中膜厚度百分比明显增加[(44.48±5.10)%vs(6.84±2.60)%,P<0.05],MCT+H2S组肺小动脉管腔狭窄程度较MCT组减轻[(21.79±4.72)%vs(44.48±5.10)%,P<0.05]。3.肥大细胞染色显示:与对照组大鼠相比,MCT组大鼠肺内的肥大细胞计数明显增高[(24.67±4.46)/10mm2 vs(5.13±2.30)/10mm2,P<0.05];肺组织中脱颗粒肥大细胞的比例亦升高显著[(52.15±9.65)%vs(12.23±8.00)%,P<0.05]。与MCT组大鼠相比,MCT+H2S组大鼠肺组织中肥大细胞计数明显减少[(12.14±3.72)/10mm2 vs(24.67±4.46)/10mm2,P<0.05];肺组织中脱颗粒肥大细胞的比例亦显著下降[(29.31±6.71)%vs(52.15±9.65)%,P<0.05]。4.MCT+H2S组大鼠血浆中IL-6较MCT组明显降低[(1596.51±202.47)pg/ml vs(2201.25±318.99)pg/ml,P<0.05]。5.与对照组比较,MCT组大鼠内源性H2S生成量显著降低[(36.20±4.49)μmmol/L vs(49.34±4.83)μmmol/L,P<0.05];与MCT组比较,MCT+H2S组大鼠血浆H2S含量明显增高[(61.24±7.26)μmmol/L vs(49.34±4.83)μmmol/L,P<0.05]。结论1.H2S内源性生成减少是MCT所致肺高压和肺动脉重塑的机制之一。2.预防性应用H2S可能通过抑制肥大细胞的聚集并抑制IL-6的释放改善肺动脉高压。
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