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泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)和大鳞副泥鳅(Paramisgurnus dabryanus)分别隶属于鳅科(Cobitidac)、花鳅亚科(Cobitinae)中的泥鳅属(Misgurnus)和副泥鳅属(Paramisgurnus),是我国两种重要的淡水经济鱼类。泥鳅以其多样的倍性组成和复杂的配子形成机制,成为鱼类多倍体起源和进化研究的良好材料。本研究以二倍体泥鳅(DD)、四倍体泥鳅(TT)和大鳞副泥鳅(PP)为材料,开展异源多倍体泥鳅的诱导,对其生长、性腺发育以及配子育性进行相关研究,现将主要结果汇报如下:1、异源多倍体泥鳅的诱导和受精细胞学观察本研究采用冷休克方式开展了6种异源多倍体泥鳅(DD×PP-0,DD×DD-0,DD×TT-0,TT×PP-0,TT×DD-0和TT×TT-0。母本在前,父本在后。0代表抑制受精卵第二极体释放诱导三倍型后代)的诱导。冷休克条件为:受精后5 min开始,2~3℃冰水冷休克处理30 min。对不同生长阶段诱导多倍体后代进行倍性鉴定。1月龄,6种冷休克诱导多倍体成功率分别为87.50%(DD×PP-0),53.85%(DD×DD-0),90.91%(DD×TT-0),84.96%(TT×PP-0),76.92%(TT×DD-0),12.5%(TT×TT-0);12月龄,诱导多倍体后代倍性组成与1月龄相似。诱导成功率随后代倍性增加而降低。荧光受精细胞学观察结果证实冷休克通过抑制受精卵第二极体的释放获得三倍体后代。2、异源多倍体泥鳅生长和性腺发育比较研究对不同诱导多倍体后代进行生长统计分析,发现早期生活史阶段不同诱导组合后代生长差异不显著,后期不同诱导组合后代生长差异显著。12月龄,以四倍体泥鳅为母本大鳞副泥鳅为父本的诱导多倍体后代(TT×PP-0)生长最快。同一诱导组合中,诱导成功后代与未诱导成功后代生长差异较小,除TT×DD-0组合中五倍体后代较三倍体后代生长慢。同时,不同诱导后代性腺发育和性腺组织细胞倍性组成存在较大差异。三倍体DD×PP-0卵巢主要包含2N和3N次级卵母细胞,精巢主要包含2.5N次级精母细胞和5N初级精母细胞;三倍体DD×DD-0卵巢主要包含2N次级卵母细胞和4N初级卵母细胞,精巢主要包含3N次级精母细胞和6N初级精母细胞;四倍体DD×TT-0卵巢主要包含2N次级卵母细胞和4N初级卵母细胞,精巢主要包含1N精细胞和2N次级精母细胞;五倍体TT×PP-0卵巢主要包含4N次级卵母细胞,精巢主要包含3N精细胞和6N次级精母细胞;五倍体TT×DD-0卵巢主要包含4N次级卵母细胞,精巢主要包含2.5N精细胞和5N次级精母细胞;六倍体TT×TT-0卵巢主要包含6N次级卵母细胞。诱导多倍体后代性腺组织细胞倍性组成与正常减数分裂结果不尽相同,推测其非正常配子形成机制主要包括:单价体丢失,非同源染色体配对分裂等方式。3、异源多倍体泥鳅的育性研究以异源三倍体泥鳅(DD×PP-0)和异源五倍体泥鳅(TT×PP-0)为材料,开展异源多倍体泥鳅育性相关研究。异源三倍体泥鳅和异源五倍体泥鳅卵巢发育良好,配子倍性组成简单,但与体细胞倍性不同,存在少量可育成熟卵子;精巢发育迟缓,多停留在精原细胞期,配子倍性组成复杂,与体细胞倍性组成亦不同,不可育;异源三倍体泥鳅雌性主要产生1N成熟卵子。异源五倍体泥鳅产生多种不同倍性配子,以2N卵子为主,同时产生少量3N成熟卵子和非整数倍性成熟卵子。同时,冷休克诱导结果证实异源五倍体后代成熟卵子第二次减数分裂可产生2N极体。4、三类四倍体泥鳅雌核发育特性研究对野生四倍体泥鳅(N-TT)、自繁四倍体泥鳅(A-TT)以及人工诱导四倍体泥鳅(M-TT)开展雌核发育相关研究,用团头鲂(Megalobrama amblycephala)灭活精子刺激四倍体泥鳅卵子发育,受精卵不进行染色体加倍处理。三类四倍体泥鳅雌核发育后代幼鱼阶段均检测到二倍体和四倍体后代,四倍体后代比例约占11.20~13.34%。四倍体雌核发育后代可存活至成鱼。根据四倍体后代父本遗传物质分析以及微卫星基因分型结果推测这种染色体自动加倍发生于受精以后,可能发生于第二次减数分裂中第二极体被抑制保留;也可能发生在第一次有丝分裂异常,DNA复制后不分离。这是首次在鱼类中发现卵子在受精以后发生染色体加倍现象。