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目的:垂体腺瘤是一种临床常见的良性颅内肿瘤,发病率大约为1/10万～7/10万,约占颅内肿瘤的10%-15%,仅次于胶质瘤和脑膜瘤。垂体腺瘤一般呈局限性生长,但部分垂体腺瘤的生长可呈侵袭性,即侵袭性垂体腺瘤。侵袭性垂体腺瘤是指肿瘤生长侵袭周围的硬膜、血管、神经、海绵窦、鞍区骨质等,手术全切除十分困难,导致术后肿瘤残余和较高的复发率,患者预后较差。垂体腺瘤的侵袭性是针对垂体腺瘤治疗上的一个热点和难点。目前针对垂体腺瘤侵袭性的诊断多依靠患者临床症状,影像学检查肿瘤有无破坏颅底骨质、侵犯海绵窦、包绕颈内动脉、视神经受压程度等,术中观察有无侵犯硬膜、骨质、视神经、颈内动脉等以及术中活检硬膜或鞍区骨质。但上述方法仍然存在较大的局限性,尤其肿瘤早期,瘤体较小的侵袭性垂体腺瘤,仅凭上述标准难以作出正确的诊断,而不能采取积极有效的综合治疗措施。骨桥蛋白(osteopontin, OPN)是一种磷酸化的分泌性蛋白,其受体包括整合素和CD34受体。大量研究证实,OPN与许多肿瘤的大小、生长、浸润、转移和预后等有关,是一种新的肿瘤标记物。基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9, MMP-9)是基质金属蛋白酶家族中分子量最大且最重要的蛋白酶,其底物主要有IV、V、VII、X型胶原、明胶及弹性纤维组成。MMP-9能够破坏细胞基底膜和细胞外基质(ECM),维持ECM的生理动态平衡,从而促进肿瘤的侵润与转移。在颅内肿瘤尤其垂体腺瘤的发生及侵袭过程中起着重要作用,在判断垂体腺瘤的侵袭性方面具有也有特异性。肿瘤生长依赖于血管生成,微血管密度(microvessel density, MVD)计数被认为是能反映肿瘤血管生成的一个指标,也是反映肿瘤生物学行为的一个重要指标。MVD与实体肿瘤的生长、复发及预后密切相关,MVD值增高提示预后往往不良。本试验应用免疫组织化学技术检测侵袭性垂体腺瘤和非侵袭性垂体腺瘤中OPN、MMP-9及MVD表达水平的差异,初步研究OPN、MMP-9、MVD三者与垂体腺瘤及其侵袭性的关系,探讨三者之间的相关性,为今后垂体腺瘤的诊断、治疗及预后提供一条可能的新途径。材料和方法:收集来自于2006年10月至2007年8月间河北医科大学附属第二医院神经外科手术切除的30例垂体腺瘤和3例脑外伤减压术正常脑组织标本。30例垂体腺瘤标本中,女性19例,男性11例。年龄16～69岁,平均年龄42岁。依据术前影像学检查及术中观察肿瘤组织有无侵犯邻近结构,将30例垂体腺瘤分为侵袭性组17例,非侵袭性组13例。应用免疫组织化学S-P法对30例垂体腺瘤和3例正常脑组织标本中OPN、MMP-9及MVD的表达分别进行检测,主要包括标本固定、蜡块包埋、组织切片;脱蜡和水化;抗原修复;滴加一抗;滴加二抗;脱水、透明、封片、镜检。实验测得数据用均数±标准差( x±S)表示。应用SPSS12.0软件进行统计分析,其中OPN、MMP-9分别采用Crosstabs Test(卡方检验),MVD采用Independent-Samples T Test(独立样本T检验)。OPN、MMP-9之间的相关性采用Spearman等级相关分析。OPN与MVD、MMP-9与MVD之间的相关性分别作直线相关回归分析,并用t检验分别检测其显著性。检验水准:α=0.05。结果:OPN在正常脑组织中呈阴性表达,肿瘤细胞中OPN的表达主要定位于细胞胞浆,非侵袭性垂体腺瘤和侵袭性垂体腺瘤中均有表达,且侵袭性垂体腺瘤明显高于非侵袭性垂体腺瘤(χ2=6.652, P<0.01);MMP-9在正常脑组织中呈阴性表达,肿瘤细胞中MMP-9的表达主要定位在肿瘤细胞胞质,MMP-9在侵袭性垂体腺瘤组中的表达明显高于非侵袭性垂体腺瘤组(χ2=8.167, P<0.01);在肿瘤细胞中FactorⅧ抗体的阳性染色位于血管内皮细胞上,侵袭性垂体腺瘤组的MVD计数显著高于非侵袭性垂体腺瘤组(t=3.581, P<0.01)。在侵袭性垂体腺瘤中OPN与MMP-9的表达具有显著相关性(rs =0.813, p<0.01);侵袭性垂体腺瘤中OPN表达与MVD计数之间具有显著相关性(r =0.716, p<0.01);同时侵袭性垂体腺瘤中MMP-9的表达与MVD计数也具有显著相关性(r =0.783, p<0.01)。结论:侵袭性垂体腺瘤组与非侵袭性垂体腺瘤组在性别及平均年龄上无显著差异:P>0.05。1与非侵袭性垂体腺瘤相比,在侵袭性垂体腺瘤组中OPN、MMP-9均呈高表达且两者之间有相关性,说明OPN、MMP-9共同参与了垂体腺瘤侵袭性,具有协同作用。2侵袭性垂体腺瘤组中MVD计数明显高于非侵袭性垂体腺瘤组,提示垂体腺瘤的侵袭性与血管生成密切相关。侵袭性垂体腺瘤中OPN、MMP-9的表达与MVD计数呈正相关,提示OPN、MMP-9可能通过参与了肿瘤微血管的生成,从而促进肿瘤的生长与侵袭。3 OPN、MMP-9、MVD与垂体腺瘤的侵袭性密切相关,一定程度上可作为评价垂体腺瘤侵袭性及其预后的辅助指标,通过检测手术切除的垂体腺瘤标本中OPN、MMP-9及MVD可判断垂体腺瘤早期的潜在侵袭性,指导垂体腺瘤的治疗方案的制定,提高患者疗效水平。