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目的:探讨环状 RNA-0000284(circular RNA-0000284,circ-0000284)对结直肠癌细胞增殖和凋亡的影响及其机制的初步研究。方法:(1)应用高通量circRNAs芯片技术筛选6例人结直肠癌组织及对应癌旁组织中差异表达的circRNAs。(2)对circRNAs表达谱进行生物信息学分析,选取部分差异表达的circRNAs应用荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR))进行验证。(3)运用qRT-PCR检测了 43例结直肠癌组织与对应癌旁组织中circ-0000284的表达水平并分析其与患者临床病理特征的关系。(4)运用qRT-PCR检测circ-0000284在人正常结肠上皮细胞(HcoEpic)与人结直肠癌细胞HT-29、HCT-116、Lovo中的表达水平。(5)在HT-29细胞中运用小干扰RNA(Small interfering RNA,siRNA)的方法下调 circ-0000284 的表达水平,CCK-8及克隆形成实验检测干扰前后circ-0000284对HT-29细胞增殖能力的影响,并运用流式细胞术检测干扰前后circ-0000284对HT-29细胞凋亡能力的影响。(6)Western blotting 检测 circ-0000284 干扰前后 Caspase-3、cleaved capsase-3、Caspase-9凋亡相关蛋白的表达水平。结果:(1)结直肠癌组织与相对应的癌旁组织之间存在892个circRNAs的差异表达,其中在肿瘤组织中高表达的有412个,低表达的有480个(变化>2倍且p<0.05)。(2)qRT-PCR 的方法验证了 circ-0000284、circ-0000994、circ-0002484、circ-0005218、circ-0007351、circ-0047351的表达情况,其结果与芯片结果一致。(3)qRT-PCR结果显示circ-0000284在结直肠癌组织中的表达水平明显上调(27/43,中位数=1.79,P<0.05),且与肿瘤的组织分化程度具有一定的相关性(P=0.002),结直肠癌分化程度越低,circ-0000284的表达水平越高。(4)对比不同的细胞系中circ-0000284的表达水平,circ-0000284在HT-29、HCT-116、Lovo细胞中的表达水平显著高于HCoEpic细胞。(5)CCK-8细胞增殖实验显示:circ-0000284-siRNA 转染 24、48、72、96 h 后 HT-29 细胞生存率分别为(0.95±0.023)、(0.82±0.035)、(0.69±0.046)、(0.51±0.038)、(0.41±0.003)较阴性对照组(0.98±0.015)、(0.91±0.039)、(0.83±0.043)、(0.71±0.033)、(0.67±0.028)明显降低(P<0.05)。(6)平板克隆结果显示:干扰circ-0000284的表达,HT-29细胞增殖能力下降(P<0.05)。(7)流式细胞仪检测结果显示:circ-0000284干扰组与阴性对照组的凋亡率分别为(23.10±1.85)%、(6.33±0.80)%,细胞凋亡能力升高(P<0.05)。(8)转染 48h 后 caspase-3 与 caspase-9蛋白的表达降低,cleaved caspase-3蛋白的表达升高。结论:(1)结直肠癌组织与对应癌旁组织比较,circRNAs表达谱发生了显著变化,提示这些差异表达的circRNAs可能与结直肠癌的发生发展密切相关。(2)circ-0000284在结直肠癌组织中的表达水平上调,且与肿瘤的组织分化程度呈负相关。(3)circ-0000284可促进结直肠癌细胞的增殖,并抑制凋亡,其作用机制可能是通过抑制caspase-3、caspase-9的表达及生物学活性,从而抑制细胞的凋亡能力。