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背景与目的：
非酒精性脂肪肝病（Non-alcoholicfattyliverdisease，NAFLD）是一种以肝脏脂质蓄积增加为主要临床表现，除长期饮酒或其它明确原因以外引起的慢性应激代谢性肝病。随着人们生活水平的提高和生活方式及饮食结构的转变，目前NAFLD已成为全球第一大慢性肝病。NAFLD与肝硬化、肝癌、心脑血管疾病及其它系统肿瘤密切相关，但由于它病程长、临床表现轻、筛查与诊断手段复杂且发病机制尚未完全阐明，NAFLD的早期诊断及干预治疗并未引起足够的重视。一般认为，肝脏脂肪变性、纤维化与肝硬化、肝癌及心脑血管疾病等是NAFLD基本病理演变过程，其发病机制尚未完全阐明。本研究首先从临床流行病学的角度，筛查和分析危险因素与NAFLD合并肿瘤、心脑血管疾病的关系；再从基础研究方面，以危险因素甘油三酯（Triglyceride，TG）的代谢底物或产物游离脂肪酸（Freefattyacids，FFA）为干预因素，探讨长链非编码RNA（Longnon-codingRNA，LncRNA）调控肝细胞脂肪变性的表观遗传学机制。
方法：
临床数据所有指标均以计数资料形式表示，分别以Logisitic回归分析方法，筛选NAFLD合并肿瘤、心脑血管疾病及肝功能异常的独立危险因素。分别用油酸、亚油酸、棕榈酸油酸干预HepG2细胞培养24小时构建肝细胞脂肪变性模型，MTT检测细胞活性；分别用siRNA-HOTAIR及NFκB抑制剂CAPE对HepG2脂肪变性细胞进行干预，定量PCR检测细胞HOTAIR及PTENRNA水平变化，Western-blotting检测PTEN蛋白水平变化，油红“O”染及定量检测细胞内TG含量；利用染色质免疫沉淀技术和定量PCR检测PTEN启动子区组蛋白H3K4met3、H3K27me3、组蛋白乙酰化转移酶P300/CBP及组蛋白H3乙酰化水平。
结果：
临床调查表明：1）在2016年1月至12月期间，汕头大学医学院第一附属医院住院患者NAFLD诊断率是27.5%；2）57.4%NAFLD患者合并了血脂异常；3）在所有血脂异常的NAFLD患者中，73.6%表现为血TG升高；4）血TG升高是NAFLD合并肿瘤尤其是良性肿瘤的独立危险因素；5）31.2%血脂异常的NAFLD患者使用调脂类药物，且仅15.5%使用的是降低血TG的药物。
基础研究显示：1）生物学信息分析发现，人类NAFLD肝细胞脂肪变性相关基因PTEN低表达与LncRNA-HOTAIR表达水平负相关；2）FFA诱导HepG2细胞脂肪变性（即细胞内TG含量增加），同时出现PTEN低表达和HOTAIR高表达；3）siRNA抑制FFA引起的HepG2细胞HOTAIR高表达后，PTEN基因表达上升且细胞内TG含量减少；4）NFκB抑制剂CAPE阻止了FFA诱导的HepG2细胞HOTAIR高表达和PTEN低表达；5）HOTAIR通过减少组蛋白乙酰化转移酶P300/CBP在PTEN基因启动子区富集，降低该区域H3乙酰化水平，同时促进PTEN基因启动子区H3K27me3上调，从而介导了FFA引起的HepG2细胞PTEN低表达；6）在FFA干预前后，HepG2细胞PTEN启动子区DNA甲基化水平无显著变化；7）FFA培养HepG2细胞24小时诱导产生脂肪变性、PTEN低表达和HOTAIR高表达的效应，在FFA撤退12小时后消失。
结论：
NAFLD住院患者诊断率很低，TG是NAFLD合并肿瘤的独立危险因素，但针对NAFLD血TG升高进行干预治疗的比率也很低。TG分解产物或代谢底物FFA通过NFκB信号通路介导肝细胞HOTAIR高表达；后者减少P300/CBP在PTEN基因启动子区富集，降低该区域H3乙酰化水平，同时促进PTEN基因启动子区H3K27me3上调，是介导FFA抑制PTEN基因表达的重要表观遗传学机制。FFA引起的肝细胞脂肪变性可能不存在“代谢记忆”效应。
非酒精性脂肪肝病（Non-alcoholicfattyliverdisease，NAFLD）是一种以肝脏脂质蓄积增加为主要临床表现，除长期饮酒或其它明确原因以外引起的慢性应激代谢性肝病。随着人们生活水平的提高和生活方式及饮食结构的转变，目前NAFLD已成为全球第一大慢性肝病。NAFLD与肝硬化、肝癌、心脑血管疾病及其它系统肿瘤密切相关，但由于它病程长、临床表现轻、筛查与诊断手段复杂且发病机制尚未完全阐明，NAFLD的早期诊断及干预治疗并未引起足够的重视。一般认为，肝脏脂肪变性、纤维化与肝硬化、肝癌及心脑血管疾病等是NAFLD基本病理演变过程，其发病机制尚未完全阐明。本研究首先从临床流行病学的角度，筛查和分析危险因素与NAFLD合并肿瘤、心脑血管疾病的关系；再从基础研究方面，以危险因素甘油三酯（Triglyceride，TG）的代谢底物或产物游离脂肪酸（Freefattyacids，FFA）为干预因素，探讨长链非编码RNA（Longnon-codingRNA，LncRNA）调控肝细胞脂肪变性的表观遗传学机制。
方法：
临床数据所有指标均以计数资料形式表示，分别以Logisitic回归分析方法，筛选NAFLD合并肿瘤、心脑血管疾病及肝功能异常的独立危险因素。分别用油酸、亚油酸、棕榈酸油酸干预HepG2细胞培养24小时构建肝细胞脂肪变性模型，MTT检测细胞活性；分别用siRNA-HOTAIR及NFκB抑制剂CAPE对HepG2脂肪变性细胞进行干预，定量PCR检测细胞HOTAIR及PTENRNA水平变化，Western-blotting检测PTEN蛋白水平变化，油红“O”染及定量检测细胞内TG含量；利用染色质免疫沉淀技术和定量PCR检测PTEN启动子区组蛋白H3K4met3、H3K27me3、组蛋白乙酰化转移酶P300/CBP及组蛋白H3乙酰化水平。
结果：
临床调查表明：1）在2016年1月至12月期间，汕头大学医学院第一附属医院住院患者NAFLD诊断率是27.5%；2）57.4%NAFLD患者合并了血脂异常；3）在所有血脂异常的NAFLD患者中，73.6%表现为血TG升高；4）血TG升高是NAFLD合并肿瘤尤其是良性肿瘤的独立危险因素；5）31.2%血脂异常的NAFLD患者使用调脂类药物，且仅15.5%使用的是降低血TG的药物。
基础研究显示：1）生物学信息分析发现，人类NAFLD肝细胞脂肪变性相关基因PTEN低表达与LncRNA-HOTAIR表达水平负相关；2）FFA诱导HepG2细胞脂肪变性（即细胞内TG含量增加），同时出现PTEN低表达和HOTAIR高表达；3）siRNA抑制FFA引起的HepG2细胞HOTAIR高表达后，PTEN基因表达上升且细胞内TG含量减少；4）NFκB抑制剂CAPE阻止了FFA诱导的HepG2细胞HOTAIR高表达和PTEN低表达；5）HOTAIR通过减少组蛋白乙酰化转移酶P300/CBP在PTEN基因启动子区富集，降低该区域H3乙酰化水平，同时促进PTEN基因启动子区H3K27me3上调，从而介导了FFA引起的HepG2细胞PTEN低表达；6）在FFA干预前后，HepG2细胞PTEN启动子区DNA甲基化水平无显著变化；7）FFA培养HepG2细胞24小时诱导产生脂肪变性、PTEN低表达和HOTAIR高表达的效应，在FFA撤退12小时后消失。
结论：
NAFLD住院患者诊断率很低，TG是NAFLD合并肿瘤的独立危险因素，但针对NAFLD血TG升高进行干预治疗的比率也很低。TG分解产物或代谢底物FFA通过NFκB信号通路介导肝细胞HOTAIR高表达；后者减少P300/CBP在PTEN基因启动子区富集，降低该区域H3乙酰化水平，同时促进PTEN基因启动子区H3K27me3上调，是介导FFA抑制PTEN基因表达的重要表观遗传学机制。FFA引起的肝细胞脂肪变性可能不存在“代谢记忆”效应。