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宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤,严重影响全世界女性的健康。本研究旨在探讨与宫颈癌淋巴结转移相关的基因在宫颈癌发生发展中的作用、参与的信号通路与分子作用机制。目的:探讨利用生物信息学筛选出在宫颈癌中显著差异表达的基因在宫颈癌发生发展中的作用及其作用分子机制。方法:从GEO数据库中下载人类宫颈癌淋巴结转移GSE26511数据集的原始文件,筛选在宫颈癌淋巴结转移过程中显著差异表达的基因,利用IHC、Western blotting和q RT-PCR检测差异基因在宫颈癌细胞和组织中的表达,IF检测SMAGP在宫颈癌细胞中的定位。si RNA沉默SMAGP后,用FC检测Ca Ski细胞周期变化情况;CCK-8,克隆形成、Ed U实验验证SMAGP对Ca Ski细胞增殖能力的影响,Transwell实验检测Ca Ski细胞迁移侵袭能力的变化情况;慢病毒筛选稳定细胞株注射裸鼠腹腔,观察裸鼠体内肿瘤的转移情况。对SMAGP差异表达的RNA样品进行RNA-Seq测序,将差异基因进行GO富集分析和KEGG分析,进一步分析SMAGP在宫颈癌发生发展中影响的信号通路并检测SMAGP影响的周期及EMT通路中,部分主要蛋白的表达水平。结果:生物信息学分析结果显示SMAGP与宫颈癌淋巴结转移有关,且在宫颈癌淋巴结转移组织中显著高表达;Western blotting和q RT-PCR结果显示SMAGP在宫颈癌组织和细胞中高表达;免疫荧光结果显示SMAGP在宫颈癌细胞胞质和质膜上表达;免疫组化结果显示SMAGP在宫颈癌组织中的表达高于正常组织,在70例癌组织中有43(61.43%)例高表达,SMAGP在肿瘤中的表达仅与肿瘤类型显著相关(p<0.001)。沉默Ca Ski细胞中SMAGP表达,FC结果显示细胞周期被阻滞在G1期,周期进程变慢;CCK-8、Ed U、克隆形成实验结果显示Ca Ski细胞增值能力减弱;Transwell实验显示沉默SMAGP表达,Ca Ski细胞迁移侵袭能力减弱。RNA-Seq结果显示,沉默SMAGP表达后,实验组与对照组相比,显著差异的基因有1324个,其中上调基因795个,下调基因529个;GO富集分析和KEGG分析显示影响的主要通路有cell migration、cell cycle、PI3K-Akt Signaling pathway、VEGF Signaling pathway、TNF Signaling pathway等;Western blotting和q RT-PCR结果显示,沉默SMAGP表达后,与对照组相比,周期相关蛋白Cyclin E、CDK2、CDK4等,EMT通路相关蛋白MMP2、β-Catenin、Twist、Vimentim等表达水平均降低。总结:我们的研究结果表明,SMAGP在肿瘤发生发展过程中发挥至关重要的作用,沉默SMAGP表达能阻滞细胞周期进程,抑制细胞的迁移侵袭,可能成为宫颈癌新的潜在治疗靶点。