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活性氧（reactive oxygen species，ROS）在植物生长发育和免疫反应中发挥重要作用。NADPH（nicotinamide adenine dinucleotide phosphate）氧化酶AtRBOHD（RESPIRATORY BURST OXIDASE HOMOLOGS D）和OsRBOHB分别是拟南芥和水稻中调控ROS产生的主要蛋白。目前对植物ROS产生的机制研究还不是很清楚，因此进一步探究模式植物拟南芥和水稻中ROS产生和调控的机制将有助于更好地了解植物免疫系统，为植物抗病育种提供更坚实的理论基础。
拟南芥BSK1（BRASSINOSTEROID-SIGNALING KINASE1）属于胞质型类受体激酶家族，正调控拟南芥先天免疫，突变体bsk1中flg22诱导的ROS积累相对野生型Col-0显著降低。通过对Col-0和突变体bsk1磷酸化蛋白质组学分析，发现RBOHD的第39位丝氨酸（Ser39）在野生型中存在磷酸化修饰，而在突变体bsk1中则没有，因此本论文对BSK1和RBOHD的功能联系进行了深入研究。同时，为了检测BSK1和RBOHD的功能联系在单子叶植物水稻中是否保守，为水稻抗病研究提供理论指导，本论文也对水稻中BSK1和RBOHD的同源蛋白OsBSK1-2和OsRBOHB的功能联系做了初步研究，主要研究结果如下：
（1）免疫共沉淀（Co-IP）、荧火素酶互补技术（LCA）以及双分子荧光互补技术（BiFC）证明了BSK1和RBOHD之间存在互作，并且该互作不依赖FLS2（FLAGELLIN SENSING2），互作强度不受flg22、elf18和chitin等PAMPs（pathogen-associated molecular patterns）诱导的影响。
（2）体外激酶实验表明BSK1可以直接磷酸化RBOHD。另外，将RBOHD Ser39位点突变成模拟持续磷酸化激活形式的天冬氨酸（D），然后在rbohd背景下表达可以回补rbohd突变体flg22诱导的ROS积累缺陷表型，说明RBOHD Ser39位点磷酸化对RBOHD介导的ROS积累起正调控作用。
（3）BSK1和BIK1协同调控ROS产生，双突变体bsk1bik1的ROS产生相对单突变体bsk1和bik1没有进一步下降。但是，进一步研究发现bsk1bik1中部分抗病相关基因组成型表达，同时对白粉菌的抗性增强。RNA-seq结果表明相比野生型Col-0，bsk1bik1中共有5829个基因的表达存在显著性差异，其中上调的有5034个，下调的有795个，暗示BSK1和BIK1同时缺失后激活了更强烈的免疫反应。
（4）LCA以及Co-IP技术可以检测到水稻OsBSK1-2和OsRBOHB存在互作，另外体外激酶实验表明OsBSK1-2可以磷酸化OsRBOHB，说明在水稻和拟南芥免疫过程中ROS产生机制可能是部分保守的。
拟南芥BSK1（BRASSINOSTEROID-SIGNALING KINASE1）属于胞质型类受体激酶家族，正调控拟南芥先天免疫，突变体bsk1中flg22诱导的ROS积累相对野生型Col-0显著降低。通过对Col-0和突变体bsk1磷酸化蛋白质组学分析，发现RBOHD的第39位丝氨酸（Ser39）在野生型中存在磷酸化修饰，而在突变体bsk1中则没有，因此本论文对BSK1和RBOHD的功能联系进行了深入研究。同时，为了检测BSK1和RBOHD的功能联系在单子叶植物水稻中是否保守，为水稻抗病研究提供理论指导，本论文也对水稻中BSK1和RBOHD的同源蛋白OsBSK1-2和OsRBOHB的功能联系做了初步研究，主要研究结果如下：
（1）免疫共沉淀（Co-IP）、荧火素酶互补技术（LCA）以及双分子荧光互补技术（BiFC）证明了BSK1和RBOHD之间存在互作，并且该互作不依赖FLS2（FLAGELLIN SENSING2），互作强度不受flg22、elf18和chitin等PAMPs（pathogen-associated molecular patterns）诱导的影响。
（2）体外激酶实验表明BSK1可以直接磷酸化RBOHD。另外，将RBOHD Ser39位点突变成模拟持续磷酸化激活形式的天冬氨酸（D），然后在rbohd背景下表达可以回补rbohd突变体flg22诱导的ROS积累缺陷表型，说明RBOHD Ser39位点磷酸化对RBOHD介导的ROS积累起正调控作用。
（3）BSK1和BIK1协同调控ROS产生，双突变体bsk1bik1的ROS产生相对单突变体bsk1和bik1没有进一步下降。但是，进一步研究发现bsk1bik1中部分抗病相关基因组成型表达，同时对白粉菌的抗性增强。RNA-seq结果表明相比野生型Col-0，bsk1bik1中共有5829个基因的表达存在显著性差异，其中上调的有5034个，下调的有795个，暗示BSK1和BIK1同时缺失后激活了更强烈的免疫反应。
（4）LCA以及Co-IP技术可以检测到水稻OsBSK1-2和OsRBOHB存在互作，另外体外激酶实验表明OsBSK1-2可以磷酸化OsRBOHB，说明在水稻和拟南芥免疫过程中ROS产生机制可能是部分保守的。