论文部分内容阅读
草莓(Fragaria ananassa Duch)属于蔷薇科(Rosaccae)草莓属 QFragaria),草本,匍匐植物。原产南美洲,现世界各地广泛种植,是世界上最重要的经济浆果。传统育种方法周期长、难度大。分子育种的兴起为草莓育种提供了新的解决方案。草莓转基因最常用的方法是农杆菌转化法,农杆菌转化法需要构建高效的草莓愈伤及再分化体系。而组织培养的污染,愈伤组织生长速度慢,再分化能力弱,试验周期长,一直是影响转基因操作的重要问题。寻找污染原因进一步降低污染问题,筛选脱分化再分化能力强的草莓品种,构建高效草莓愈伤不定芽体系,缩短试验周期,就具有非常重要的意义。主要研究结果如下:1.筛选出 NOR156,NOR164,NOR1,NOR118,NOR147,ES8,ES6,ES 12,LIT1,LIT7,FIN53,SL01,IT18,IT20,IT1,IT6,共 16 个相对生长速度快的草莓类型。2.探究了组织培养污染原因通过对397个培养基污染进行详细观测,总结污染产生的规律,发现外植体离体时间与外植体本身的健康程度会很大程度影响污染率和消毒效率。选择相对健壮的外植体,缩短离体时间,减少外植体水分流失,减少试验操作以及消毒过程中外植体损伤,减少伤口的数量可以有效降低污染率。消毒剂的浓度也应与外植体的健壮程度相关,并试验出本次试验所采取的高效消毒法:流水冲洗1h,无菌水冲洗一次,2%的次氯酸钠溶液消毒3min,次氯酸钠消毒后,用无菌水冲洗3遍,40%的PPM溶液浸泡30s。3.通过对栽培过程中组培苗与扦插苗生长速度形态学上的差异,试验组培苗叶片、组培苗叶柄、扦插苗叶片、扦插苗叶柄之间的愈伤生长能力以及不定芽的再生能力不同。发现消毒后的扦插苗叶柄具有一定的不定芽产生优势。在品种愈伤与不定芽生长差异对照中发现16种草莓类型:NOR156,NOR164,NOR1,NOR 118,NOR 147,ES8,ES6,ES 12,LIT1,LIT7,FIN53,SL01,IT18,IT20,IT1,IT6。其中ES8类型草莓在各类外植体来源不同的情况下,都具有相对突出的不定芽生长能力。在探究各草莓苗离体叶片SOD与POD关系时,SOD未体现出显著性差异,POD试验里,ES8也体现了相对较高的POD含量。