解氏肝癌2号方对肝癌H22荷瘤小鼠的抑瘤的实验研究

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目的:原发性肝癌(primary liver cancer,PLC,以下简称肝癌)起病隐匿,多数患者确诊时已为晚期。晚期肝癌的生存期一般只有3-6个月。肝癌对放、化疗敏感性差,目前仍以手术治疗为主,但多数患者确诊时已失去手术治疗的机会。中药治疗肝癌具有很大的潜力,发挥中药在治疗肝癌中的优势是一个非常有意义的探索。通过本次实验,期冀研究并证实解氏肝癌2号方有较好的抗肿瘤及免疫调节作用。方法:复苏肝癌细胞H22,离心,收集细胞放入1mL生理盐水中混匀,等分两份,2只BALB/C小鼠腹腔注射,饲养1周后取小鼠腹水制备模型。用生理盐水稀释成浓度为1×107个/mL的细胞悬液,于建模小鼠的右侧腋窝皮下接种0.2mL/只。另取BALB/C小鼠(18-22g)40只,雌雄各半,全部小鼠均将制备好的细胞悬液以0.2ml/只,移植于小鼠右腋皮下(肿瘤细胞数约为2×106个),复制H22肝癌小鼠模型。实验第2天(造模24h后),将接种后的小鼠随机分为模型组、解氏肝癌2号方组、中药半枝莲组、IL-2(Interleukin-2,白细胞介素-2)组共4组,每组10只。模型组:灌服生理盐水0.4ml;解氏肝癌2号方组:按1ml药液相当于1.5g生药剂量,每日0.4ml灌服;IL-2组:按14万u/kg给药(为临床成人日用量的20倍),0.2ml/只腹腔注射;中药半枝莲组:按1ml药液相当于1.5g生药剂量,每日0.4ml灌服,共14天。第15天处死小鼠,取出肿瘤,称取瘤重,计算抑瘤率、胸腺指数、脾指数等指标并通过免疫组化法检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达。结果:1.解氏肝癌2号方对体重变化的影响:解氏肝癌2号方组、中药半枝莲组与IL-2组体重增加均高于模型组(p<0.05),而解氏肝癌2号方组与IL-2组体重增加更为明显。2.解氏肝癌2号方对抑瘤率的影响:解氏肝癌2号方组,中药半枝莲组,IL-2组3组对荷瘤小鼠的瘤体均有不同程度抑制作用,解氏肝癌2号方组的抑瘤率与中药半枝莲组相仿,二者均高于IL-2组。3.解氏肝癌2号方对免疫器官指数的影响:结果显示,解氏肝癌2号方组与IL-2组的胸腺指数和脾脏指数无明显差异(p>0.05),均明显高于中药半枝莲组及模型组(p<0.05)。4.解氏肝癌2号方对荷瘤小鼠细胞凋亡的影响:解氏肝癌2号方组Bcl-2的含量与中药半枝莲组相仿,低于模型组和IL-2组,模型组最高,而Bax正好相反,解氏肝癌2号方组与中药半枝莲组均高于模型组和IL-2组,模型组最低。结论:通过本实验得出,解氏肝癌2号方能明显改善小鼠的一般生活状态,增加小鼠体重,对肿瘤有明显抑制作用,并且下调肝癌H22荷瘤小鼠的凋亡相关蛋白Bcl-2的表达,上调Bax的表达,能够明显改善机体免疫功能,减轻恶性肿瘤对机体的损害,减轻病痛,使人体与癌肿长期共存,互不侵犯。本实验为临床“带瘤生存”理念提供了坚实的理论基础。
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