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日本血吸虫病是一种分布广泛,危害严重的人畜共患的寄生虫病,对人类的身体健康和社会经济的发展造成不可忽视的危害,其致病机理主要是肝脏发生慢性感染,最终诱导肝脏产生病变,因此宿主免疫系统和寄生虫之间的相互作用在防治日本血吸虫病的工作中极其重要。目前对于该病的治疗最有效的药物是吡喹酮,虽然吡喹酮的药物治疗效果相对理想,但由于吡喹酮被用于血吸虫病的治疗有很多年了,可能会使血吸虫产生抗药性,虽然目前尚未有抗性地理株被发现,但不能忽视耐药性产生的可能。因此加快寻找新的且有效果的治疗方法,特别是对安全有效的疫苗的开发非常必要。我们实验室之前已有的研究中发现,辐照致弱(RA)血吸虫疫苗能较好的诱导宿主产生保护性免疫反应,有开发为疫苗的前景,但是辐照致弱血吸虫疫苗是怎样引起宿主产生保护性免疫反应的机制还不清楚。树突状细胞(DC)是一种专职递呈抗原的细胞,在血吸虫与宿主免疫系统之间的作用关系中发挥很重要的作用。我们推测辐照致弱血吸虫较正常血吸虫能够更好地活化DC成熟,从而引起宿主产生较好的高保护性免疫反应,并且RA血吸虫和正常血吸虫有不同的死亡方式。为验证这一猜测,我们开展了辐照致弱血吸虫活化宿主树突状细胞机制的研究工作。首先,为了探究辐照致弱(RA)血吸虫对DC表型成熟的影响,我们利用流式细胞术从细胞水平进行探究。我们把在体外培养4d、7d、10d、14d的辐照组血吸虫和正常组血吸虫,分别与体外培养的DC细胞共同培养24h后,流式细胞术检测DC表面的标志分子和共刺激分子MHC-Ⅱ、CD80、CD86、CD40的表达情况。发现4d和10d时,RA血吸虫组DC表面共刺激分子CD40、CD80、CD86和MHC-Ⅱ类分子四者的表达水平都比正常血吸虫组高(P<0.05);7天和14天时,RA血吸虫组DC表面共刺激分子CD80、CD86和MHC-Ⅱ类分子的表达水平都比正常血吸虫组高(P<0.05),但CD40在两组中的表达差异不明显;结果辐照虫体与正常虫体相比上调表达MHC-Ⅱ、CD40、CD80和CD86这些标志分子。表明辐照虫体与正常虫体相比,能更好的刺激小鼠DC表型成熟,从而引起宿主产生较好的高保护性免疫反应。其次为进一步探究RA血吸虫对DC功能成熟的影响,我们采用ELISA法从分子水平进行探究。我们把在体外培养上述四个时期的辐照组和正常组血吸虫尾蚴/童虫分别与DC细胞共培养24h后,收集虫体与DC共培养的上清并检测细胞因子IL-4、IL-12、IFN-γ和TNF-α的表达。结果辐照虫体较正常虫体上调表达细胞因子IL-4、IL-12、TNF-α和IFN-γ,表明RA血吸虫与正常血吸虫相比诱导DC功能成熟的能力更强。综上,细胞水平和分子水平两个层面能够说明RA虫体与正常虫体相比具有更强的刺激小鼠DC成熟的能力,因此能诱导宿主产生更好的保护性免疫反应。最后,为了进一步探究RA血吸虫童虫与正常血吸虫童虫在细胞死亡方式上是否存在差异,我们把上述体外培养的四个期别RA血吸虫和正常血吸虫收集并经过处理后利用基因芯片杂交技术,检测两组虫体的基因表达情况,并从转录本组分析和比较两组差异基因的表达。分析结果表明,辐照组与正常组血吸虫的基因表达存在差异,这些差异基因通过KEGG和GSEA分析能够富集到免疫原性死亡相关信号通路,提示正常组和辐照组虫体细胞的死亡方式不同,辐照组虫体偏向于免疫原性细胞死亡,而正常组虫体主要进行正常的细胞凋亡。本研究为RA血吸虫诱导宿主产生高保护性免疫反应的机制做了初步探索,为血吸虫疫苗的研制做出了贡献,为后续实验打下了基础。