骨髓间充质干细胞移植联合超短波治疗对大鼠脊髓损伤功能恢复的影响

来源 :中国医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Stanleytsang627
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目的:  本文研究旨在探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)联合超短波对外伤性脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)的治疗作用。  方法:  72只SD大鼠,被随机分成5组:假手术组;对照组,在造成SCI后给予DMEM/F12培养基注射治疗;超短波组,在损伤后第2d开始给予小剂量超短波治疗,每日一次7min治疗直至取材前;BMSCs移植组,在大鼠SCI后的第7d,将5μL(1×106/μL) GFP-BMSCs注射到其损伤部位;BMSCs联合超短波治疗组,在损伤后第2d开始给予其小剂量超短波治疗,每日一次7min治疗直至取材前,并且在大鼠SCI的第7d,将GFP-BMSCs注射到其损伤部位。大鼠的运动功能用BBB评分进行评定,并在取材前做足印分析及运动诱发电位(MEP)分析;Cresyl Violet染色观察脊髓损伤处空洞及损伤面积;同时采用胶质纤维酸性蛋白(GFAP)抗体及ED1抗体进行免疫荧光染色及Real time RT-PCR检测,并观察植入的BMSCs的存活及分化情况,观察BMSCs移植联合超短波治疗对大鼠SCI后功能恢复的影响,并初步探讨其作用机制。  结果:  实验结果显示,SCI术后2-7w,BMSCs+USW组BBB评分明显高于对照组和BMSCs组,但对照组、USW组、BMSCs三组之间没有明显差异;与对照组相比,USW、BMSCs+USW组的足印分析总足角变小(P<0.01,P<0.001);研究还发现BMSCs+USW组损伤面积及空洞面积较其他组小,具有统计学意义;GFAP免疫荧光染色观察可见BMSCs+USW组有GFAP阳性及GFP-BMSCs共表达细胞。同时还发现,BMSCs+USW组的ED1阳性细胞(巨噬细胞标记物)表达面积和MEP潜伏期检测均优于其他组(P<0.01,P<0.001)。但各组ED1 mRNA和GFAPmRNA表达量无显著差异。  结论:  BMSCs可在脊髓损伤处分化为星型胶质细胞,BMSCs联合超短波可以减轻损伤处炎症反应以及空洞面积,促进胶质细胞再生和运动功能的恢复,两者联合在脊髓损伤修复治疗中具有协同作用。
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