【摘 要】
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人类p53基因存在于17p13.1染色体上,编码分子量为53kDa的核磷酸化蛋白,p53基因是迄今发现的与人类肿瘤相关性最高的基因。P53基因突变及其表达产物在肿瘤发生时常伴随发生,且
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人类p53基因存在于17p13.1染色体上,编码分子量为53kDa的核磷酸化蛋白,p53基因是迄今发现的与人类肿瘤相关性最高的基因。P53基因突变及其表达产物在肿瘤发生时常伴随发生,且p53表达者预后较差,提示其与肿瘤的发生密切相关,检测其基因突变株及表达产物有助于肿瘤的诊断。p53基因突变后导致蛋白的组化性质发生改变,蛋白的稳定性大大增加,可通过分子生物学方法、免疫组化法、血清学等多种方法分析。而免疫组化方法是目前临床上对肿瘤,特别是疑难肿瘤分析检测所采用的重要方法,可以利用它分析p53基因突变诱导表达的蛋白在肿瘤组织中的情况。本实验利用本实验组构建的PQE-p53表达质粒,在大肠杆菌M15表达系统中进行p53表达。建立p53蛋白在原核生物中的表达纯化方法,制备纯化的p53蛋白及相对抗体。目前虽然用于p53抗原检测的单、多抗很多,但大多是进口产品。所以基于以上情况我们尝试制备出可用于检测的单、多克隆抗体对肿瘤石蜡切片进行免疫分析,与进口产品其相比价格会大大降低,有助于肿瘤p53基因表达和突变的研究。
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