【摘 要】
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目的:鉴定通过离子交换层析和亲和层析纯化方法后得到的NanC蛋白，并探究NanC蛋白体外对人急性早幼粒白血病细胞株HL60和人急性单核白血病细胞株THP-1细胞增殖和细胞凋亡的影响
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目的:鉴定通过离子交换层析和亲和层析纯化方法后得到的NanC蛋白，并探究NanC蛋白体外对人急性早幼粒白血病细胞株HL60和人急性单核白血病细胞株THP-1细胞增殖和细胞凋亡的影响，并探究NanC蛋白作用机制。方法：（1）用SDS-PAGE电泳鉴定纯化后的NanC蛋白。（2）用MTT法测定不同剂量NanC蛋白对HL60细胞和THP-1细胞细胞增殖，并用流式细胞数监测Nanc对细胞凋亡的影响。（3）采用realtime-PCR和Western blot方法检测基因mRNA水平和蛋白水平表达情况，探究NanC蛋白体外抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡作用机制。（4） Western blot方法检测NanC蛋白作用涉及到的信号转导途径。结果：（1）SDS-PAGE电泳结果显示NanC蛋白纯度较高。（2）体外抗肿瘤活性研究发现，NanC蛋白体外有良好的抗肿瘤活性，能抑制THP-1细胞细胞增殖，诱导细胞凋亡。（3）NanC蛋白体外抗肿瘤活性机制研究发现，NanC蛋白诱导细胞凋亡作用可能通过激活凋亡相关基因Bax和下调Bcl-2基因实现。（4）NanC蛋白体外对肿瘤细胞活性影响主要通过NF-κB信号转导通路，能有效调控p65基因表达。结论：（1）NanC蛋白在肿瘤研究领域也有一定作用，体外对肿瘤细胞增殖，细胞凋亡有显著作用，并能激活细胞经典凋亡信号途径。（2）NanC蛋白体外对肿瘤细胞活性影响主要涉及到NF-κB信号转导通路，通过调控NF-κB信号转导通路家族成员的表达来激活NF-κB信号转导通路。
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