褪黑素对脂多糖诱发妊娠期母鼠胎鼠TNF-α及IL-10释放的干预研究

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目的:研究孕晚期腹腔注射褪黑素(Melatonin, MT)对细菌脂多糖(Lipopolysac- charide, LPS)引起大鼠TNF-α和IL-10释放的影响。方法:选用妊娠第19天SD大鼠,随机分为三大组:对照组、LPS组、MT处理组。LPS组和对照组分别予腹腔注射LPS(500μg/kg)和等容积生理盐水;MT处理组分为同时腹腔注射LPS 500μg/kg+MT 10mg/kg、MT注射(10mg/kg)后半小时+ LPS(500μg/kg)组、MT注射(10mg/kg)后2小时+ LPS(500μg/kg)组、MT注射(10mg/kg)后6小时+ LPS(500μg/kg)组。每小组5只孕鼠。所有孕鼠均于LPS注射后1.5小时取血,处死孕鼠,立即取出胎脑组织,ELISA法测定TNF-α及IL-10含量。所有数据经SPSS16.0统计软件进行统计分析。结果:1. MT对LPS引起孕鼠血清炎性细胞因子释放的影响:1.1 MT对LPS引起孕鼠血清TNF-α的影响:与对照组比较,所有注射LPS的孕鼠,血清中TNF-α含量均明显升高(P<0.001);与LPS组比较,MT处理组血清TNF-α含量显著下降(P<0.001);与MT和LPS同时处理组相比,MT预处理组血清TNF-α含量下降但无统计学差异。1.2 MT对LPS引起孕鼠血清IL-10的影响:所有注射LPS的孕鼠,血清中IL-10含量均升高(P<0.001);与LPS组比较,MT处理组血清IL-10含量明显升高(P<0.005);与MT和LPS同时处理组相比,MT提前30分钟和2小时注射组IL-10含量上升,其中MT提前2小时注射组与同时处理组相比有统计学意义(P<0.01),但MT提前6小时组IL-10水平降低且有统计学意义。2. MT对LPS引起的胎脑组织炎性因子释放的影响:2.1 MT对LPS引起的胎脑组织TNF-α的影响:与对照组相比,孕鼠注射LPS后,胎脑中TNF-α浓度均升高(P<0.05);与LPS组比较,MT处理组胎脑中TNF-α含量降低,但无统计学意义;与MT和LPS同时处理组相比,MT预处理组TNF-α含量下降但无统计学差异。2.2 MT对LPS引起的胎脑组织IL-10释放的影响:与对照组相比,孕鼠注射LPS 1.5h后,胎脑中IL-10浓度均升高,有统计学差异(P<0.05);与LPS组比较,MT处理组胎脑中IL-10含量上升有统计学意义(P<0.05);与MT和LPS同时处理组相比,MT预处理30分钟和2小时组IL-10含量升高,其中预处理2小时组有统计学意义(P<0.05)3.相关性分析显示:孕鼠注射LPS后血清TNF-α和IL-10分泌呈正相关(r =0.531, P =0.003);注射LPS后胎鼠脑组织TNF-α和IL-10分泌的相关性分析显示无统计学意义(r=0.107, P =0.574);注射LPS后血清TNF-α与胎脑组织TNF-α分泌呈正相关(r=0.667, P<0.001);注射LPS后血清IL-10分泌与胎脑组织IL-10分泌呈正相关(r =0.726, P<0.001)。结论:1.孕晚期腹腔注射脂多糖使母血和胎脑中TNF-α、IL-10含量升高;2. MT对脂多糖引起的宫内感染的保护作用,可能与MT调节LPS引起的促炎细胞因子和抗炎细胞因子的释放有关;3.与脂多糖和褪黑素同时处理相比,褪黑素预处理的保护作用更明显。
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