论文部分内容阅读
柑橘类水果,富含多种天然生物活性成分,而这些活性成分对机体的某些疾病具有预防和控制作用,故其较多活性成分已应用于食品行业和医药行业等,这也是近年来柑橘类水果被许多科研工作者高度关注的原因。本文主要对柑橘类水果中六种功效成分在线检测RP-HPLC方法建立及其抗氧化能力进行研究,为今后研究和开发柑橘类水果的科研工作者提供一定的理论参考。采用RP-HPLC法,对不同品种柑橘类水果中的6种功效成分(柚皮苷、橙皮苷、柚皮素、橙皮素、柠檬苦素、诺米林)及11种多酚功效成分进行含量测定；参考GB/T19416-2003方法、GB/T5009.157-2003方法,分别采用比色法、RP-HPLC法,对不同柑橘类水果样品中总黄酮含量、有机酸(酒石酸、苹果酸、柠檬酸、丁二酸)含量进行分析研究；采用ORAC法,对不同品种柑橘类水果的抗氧化能力研究,该方法以偶氮类化合物2,2’-azobis(2-methylpropionam-id ine) dihydrochloride (AAPH)为过氧自由基来源,荧光素钠Sodium Fluorescein (FL)为荧光指示剂来评价抗氧化剂的抗氧化能力,使用荧光微孔板分析仪进行分析,其结果以维生素E水溶性类似物trolox的当量来表达。得到的结果如下：1建立六种功效成分在线检测RP-HPLC方法,建立的方法准确、可靠,可用于该6种功效成分在柑橘类水果样品的含量测定：柚皮苷、橙皮苷、柚皮素、橙皮素、柠檬苦素、诺米林在1.7～266.8μg/mL范围内线性关系良好,R2均≥0.9993,6种功效成分的加标回收率范围为94.6%～111.9%,定量限范围为0.40ng～4.77ng,检测限范围为0.12ng～1.43ng。,其中,柚类水果中柚皮苷含量高于其余柑橘样品,南非所产红西柚的柚皮苷含量高达1598.7mg/kg,橙类样品中橙皮苷含量高于其余样品,赣南脐橙的橙皮苷含量高达3302.4mg/kg。211种多酚功效成分的对称性及分离度良好,在75min内能完全分离,并且线性关系良好,R2均≥0.9999。该方法准确、可靠,可用于不同柑橘类水果样品的含量测定,取得了满意的效果,在柑橘类水果中,所测大部分柚类水果的多酚物质种类略少于其余柑橘样品,如广西所产金桔中金丝桃苷含量高达308.4mg/kg。3总黄酮(以芦丁计)标准品芦丁质量在0.2mg～1mg范围内线性关系良好,R2=0.9952,在有机酸检测数据中,酒石酸、苹果酸、柠檬酸、丁二酸在11.0～1001.0μg/mL范围内线性关系良好,R2均≥0.9999。GB/T19416-2003方法、GB/T5009.157-2003方法用于不同柑橘类水果样品的总黄酮含量、有机酸(酒石酸、苹果酸、柠檬酸、丁酸)含量检测,不同柑橘类水果样品均显示不同含量差异,其中柠檬类水果的柠檬酸含量均高于其余柑橘样品,南非柠檬高达11618.6mg/kg。4采用ORAC法,Trolox标准品在3.125μM-50μM范围内线性关系良好,R2=0.9967,标准品、质控品Vc、样品的RSD均<20%,其中江西所产品种柚的ORAC值最高,高达581μmol Trolox TE/g。ORAC法对不同柑橘类水果的抗氧化能力研究,获得了准确的结果,其中,柚类水果的ORAC值略高于其余柑橘样品,ORAC值均值为31.62±16.03μmol Trolox TE/g。