【摘 要】
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研究目的: 研究Ⅱ型cGMP依赖性蛋白激酶(cGMP dependent protein kinaseⅡ，PKGⅡ)对包括人非小细胞肺癌细胞株A549、人肝癌细胞株HepG2、人肾癌细胞株OS-RC-2、人结肠癌细
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研究目的: 研究Ⅱ型cGMP依赖性蛋白激酶(cGMP dependent protein kinaseⅡ，PKGⅡ)对包括人非小细胞肺癌细胞株A549、人肝癌细胞株HepG2、人肾癌细胞株OS-RC-2、人结肠癌细胞株SW480和人胶质瘤细胞株U251在内多种肿瘤细胞株的由表皮生长因子(Epidermal growth factor, EGF)启动的增殖、迁移和凋亡等生物学活动改变的抑制作用。 研究方法: (1)以编码PKGⅡ cDNA的腺病毒Ad-PKGⅡ感染各肿瘤细胞株，使其高表达PKGⅡ，并以cGMP类似物8-pCPT-cGMP特异性激活PKGⅡ。 (2)用CVTK方法检测细胞的增殖。 (3)用Transwell检测细胞的迁移。 (4)用TUNEL检测细胞的凋亡。 (5)用Pull-down方法检测活性小G蛋白Rac1的水平。 (6)用Western Blotting检测相关蛋白的表达和磷酸化水平。 研究结果: (1) PKGⅡ抑制EGF诱导的肿瘤细胞的增殖，并抑制与增殖相关的PCNA的表达和ERK的磷酸化。 (2) PKGⅡ抑制EGF诱导的肿瘤细胞的迁移，并抑制与迁移相关的小G蛋白Rac1的活化和MMP2和MMP7蛋白的表达。 (3) PKGⅡ拮抗EGF的抗凋亡效应，并影响凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达，降低Bcl-2/Bax比值。 (4) PKGⅡ阻断EGF对EGFR的活化。 研究结论: 研究结果显示，在五种肿瘤细胞株中，PKGⅡ通过阻断EGF对EGFR的活化，进而抑制EGF诱导的细胞增殖和迁移，并抑制EGF拮抗凋亡的效应，发挥抗癌作用。表明PKGⅡ具有广谱抗癌作用，是一潜在的抑癌因子。
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