鸡新城疫B<,95>株弱毒疫苗及B<,95>株病毒RT-PCR检测方法的研究

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lml2009
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本试验首先就NDV B95株在鸡胚和Vero细胞上的培养效果进行了比较,选择了培养效果好的鸡胚尿囊腔接种途径,增殖培养了B95株病毒。经对培养的病毒尿囊液检测,EID50达107.75。在无菌性检验和安全性检验中均符合疫苗要求,将其选作试验用疫苗,对其滴鼻点眼免疫和拌料免疫的最小免疫剂量进行了测定。结果表明,该苗滴鼻点眼免疫的最小剂量为105.75,拌料免疫最小剂量为106.75。对NDV B95株疫苗滴鼻点眼免疫、同居接触免疫和拌料免疫的免疫效力和免疫期进行了试验,结果显示,以B95株疫苗滴鼻点眼免疫的鸡,在免疫后5天时就可产生坚强的免疫力,免疫期可达4个月。在同居接触免疫试验中,同居接触免疫鸡均获得了良好的免疫效果,攻毒总保护率与NDV B95株滴鼻点眼免疫差异不显著,显示了 B95株良好的水平接触免疫效果。NDV B95株拌料免疫试验显示,6个月试验期里的攻毒总保护率为66.7%,与NDV B95株滴鼻点眼免疫差异不显著,表明NDV B95株拌料免疫是可行的。对B95株苗的室温保存期和0~4℃保存期进行测定显示,B95株苗在0~4℃条件下保存4个月,免疫攻毒保护达80%;在室温下保存2个月,免疫攻毒保护达100%。此外,为了今后对B95株苗作进一步理论和应用研究,本试验还设计了一对B95株的特异引物NDV-P1/P2,探讨了对其进行RT-PCR检测的可行性。结果证明,用该引物可以扩增出一条310bp的特异核酸带,敏感性为0.0043ng/ul。
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