论文部分内容阅读
背景:胃癌在消化道恶性肿瘤中最为常见,我国胃癌发病率居肺癌之后排第二位。对于不能手术的进展期胃癌,近年来化疗及靶向治疗已取得较大成效,但总体效果仍不理想,许多地区进展期胃癌的5年生存率更是不足20%。为进一步提高胃癌的治疗效果,有必要不断探索新的治疗方法。A型肉毒毒素(botulinum toxin type A, B TX-A)是一种由肉毒梭菌产生的神经毒素,已广泛应用于美容领域及肌肉痉挛性疾病的治疗。近年来,有研究报道BTX-A可以抑制前列腺癌及乳腺癌细胞的增殖。动物实验研究表明,BTX-A可通过去神经化作用抑制小鼠胃癌的生长,但BTX-A能否对胃癌细胞有直接抑制作用,机理如何,目前尚属空白。目的:通过对BTX-A对胃癌细胞增殖和迁移能力的影响的研究,探索BTX-A对胃癌细胞是否有抑制作用,为胃癌治疗探索新的方法。方法:选取两株胃癌细胞系BGC-823和MGC-803作为本实验的研究对象。采用MTT法和克隆形成实验检测BTX-A对胃癌BGC-823和MGC-803细胞系增殖能力的影响;采用细胞划痕实验检测BTX-A对胃癌BGC-823和MGC-803细胞系迁移能力的影响。结果:①不同浓度(0.25 IU/ml、0.5 IU/ml、1 IU/ml) BTX-A对BGC-823和MGC-803细胞系的增殖均有抑制作用,且随着剂量增大,抑制作用增强。其中,1 IU/ml BTX-A对BGC-823和MGC-803细胞系的抑制作用最为明显。1 IU/ml BTX-A组与对照组(0 IU/ml) BGC-823和MGC-803细胞系的吸光度(OD值)分别为0.54±0.02 vs.0.62±0.01、0.50±0.01 vs.0.56±0.02,差异具有统计学意义(p<0.05)。②1 IU/ml BTX-A作用不同时间(0h、24h、48h、72h、96h)对BGC-823和MGC-803细胞系的增殖能力均具有抑制作用,且随着时间延长,抑制作用增强。72h时,BGC-823和MGC-803细胞系实验组与对照组的吸光度(OD值)分别为0.46±0.03vs.0.52±0.03、0.59±0.01 vs.0.66±0.02,差异具有统计学意义(p<0.05);96h时,BGC-823和MGC-803细胞系实验组与对照组的吸光度(OD值)分别0.47±0.04vs.0.56±0.05.0.62±0.01 vs.0.69±0.01,差异具有统计学意义(p<0.05)。③通过克隆形成实验证实,BTX-A可以抑制BGC-823和MGC-803细胞系克隆形成能力。经BTX-A作用14d后,BGC-823和MGC-803细胞系实验组及对照组的克隆形成数目分别为229.33±17.99 vs.297.33±19.69、77.33±9.98 vs.157.33±16.11,差异具有统计学意义(p<0.05)。④通过细胞划痕实验发现,BTX-A可以抑制BGC-823和MGC-803细胞系的迁移能力,且随着时间延长,抑制效果增强。经BTX-A作用72h后,BGC-823和MGC-803细胞系实验组及对照组的划痕宽度分别为15.87±0.57vs.8.30±0.75、 15.87±1.18vs.9.17±1.86,差异具有统计学意义(p<0.05)。结论:BTX-A对胃癌细胞具有抑制作用,随着剂量的增加及作用时间的延长,抑制作用更加明显。同时,BTX-A还可以抑制胃癌细胞的迁移能力,且随着时间延长,抑制作用更加明显。