毛白杨木质素生物合成途径中若干关键酶基因克隆与分析

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木质素是地球上含量最为丰富的有机多聚物之一,在植物细胞壁中含量仅次于纤维素。植物中木质素的含量和组成对于木材的品质,造纸工业,畜牧业都有这至关重要的影响。造纸中去除纸浆中的木质素是现今造纸工业中最为花费人力、财力的事情。通过分子生物学手段研究木质素的生物合成过程的关键的酶,为进一步鉴定它们的功能,为了解木质素生物合成的奠定分子生物学基础。本研究利用已建立的毛果杨基因组序列库,NCBI数据库和相关文献检索到木质素生物合成过程中必需的八个酶(CCR、CAD、COMT、4CL、CCoAOMT、C4H、F5H、PAL)的基因,根据引物设计的基本原则设计合成引物八对。以毛白杨基因组DNA为模板,利用这些引物通过PCR扩增并成功克隆到了木质素合成过程中三个酶的基因:CCR、CAD、COMT。同时通过生物信息学方法对已克隆出的三个酶DNA、cDNA、蛋白质序列进行比对分析及蛋白质的二级结构分析,并模拟了这三个蛋白的三维结构。
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