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目的:子痫前期(preeclampsia,PE)是妊娠期高血压疾病的一种,是产科严重的并发症,对母儿的健康造成严重威胁。全身小动脉痉挛是子痫前期-子痫的基本病变。使用有效药物解除小动脉痉挛可在降压的同时改善全身微循环障碍及组织缺血缺氧,改善母婴结局。目前硫酸镁是广泛应用于临床的解痉药物,但是因其治疗剂量与中毒剂量接近使其副反应及不良反应较多,使其在临床应用无较高安全性及有效性。中药制剂川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMp)在心血管疾病有显著的疗效使产科临床工作者开始关注并应用于临床妊娠高血压综合征的治疗,发现TMp(或者联合硫酸镁)治疗妊娠高血压综合征能有效改善患者的临床症状,减少并发症的发生,有较高安全性及有效性[1?6]。但TMp治疗妊娠高血压综合征的机制现不明确。研究发现,TMp可激活正常人体肠系膜血管平滑肌细胞大电导钙激活钾通道[7](big conductance Ca2+-activated channel,BKCa)。当BKCa通道被激活,细胞膜发生超级化,抑制电压依赖性钙通道的活性,减少了Ca2+的内流,血管舒张,血压下降[8]。因此血管平滑肌中的BKCa通道是主要参与血管平滑肌张力调节的离子通道。肠系膜动脉作为形成外周阻力的主要血管,对血压调节具重要作用。前期研究证实TMp对PE患者胎盘小动脉平滑肌细胞BKCa通道有激活作用,且这种激活作用有一定的浓度依赖性。本实验采用单通道膜片钳技术,观察PE患者肠系膜动脉平滑肌细胞的BKCa通道的变化,以及在TMp作用下PE患者肠系膜动脉平滑肌细胞的BKCa通道的变化,探讨TMp对PE的作用机制,为寻找更有价值的治疗药物有极重要的理论与实践意义,为PE的治疗提供一定的理论依据。方法:⑴取诊断为子痫前期并行剖宫产手术的患者为PE组(15例);取同期无产科并发症和合并症,因瘢痕子宫和骨盆因素行剖宫产的足月产妇为NLP(normol late pregnancy)组(10例)。选取其直径为1-2mm为的肠系膜动脉,显微镜下剔除血管周围组织后将其剖开并剪成2mm2大小,应用两步急性酶分离法获得单个平滑肌细胞。选取立体感较强,表面光滑的平滑肌细胞进行实验。⑵贴壁的细胞置于对称性高钾溶液中,在内面向外膜片下观察两组肠系膜动脉平滑肌细胞BKCa通道的活性变化;⑶在+40mv去极化电压条件下,PE组细胞其中10例在较低浓度(mmol/L)TMp的作用下(0.73、2.20、3.67、5.14),另外5例在较高浓度(mmol/L)TMp的作用下(6.60、8.07、9.51),都分别在贴附式和内面向外式膜片上记录通道的电流。⑷所得电流数据通过膜片钳放大器(CEZ-2200)输入计算机,用Pclamp(6.0)软件系统采集电流,Clampfit 10.1软件系统进行数据分析。结果:⒈在对称性高钾溶液中,内面向外式膜片上记录到的人肠系膜动脉平滑肌细胞的BKCa单通道符合BKca通道的特点:电导值较高,为227.11±12.365p S(n=10);有明显的电压依赖性和钙敏感性;在+30mv的去极化电压下200n M的北非蝎毒素(Iberiotoxin,Ib Tx)几乎完全阻断通道的电流活动。⒉在游离钙浓度为10-7M的对称性高钾溶液中(Vm=+40mv),内面向外式膜片上记录的BKCa通道电流显示:与NLP组相比,PE组BKCa通道的NPo、Amp、To减少,Tc延长(n=10,P<0.05)。⒊在游离钙浓度为10-7M的对称性高钾溶液中(Vm=+40mv),改变浴液中TMp的浓度(1)在PE组(较低TMp浓度组)细胞:在贴附式膜片上BKCa的NPo、Amp、To、Tc无明显变化(n=10,P>0.05);而在内面向外膜片上BKca通道的NPo增加、Tc缩短(n=10,P<0.05),To有所减少、Amp无明显变化(n=10,P>0.05)。(2)PE组(较高TMp浓度组)细胞:在贴附式膜片上BKCa通道的NPo、Amp、To、Tc无明显变化(n=5,P>0.05);而在内面向外膜片上当TMp的浓度达8.07mmol/L时,再增加药物浓度BKca通道的NPo未继续增加、Tc未继续缩短、Amp、To无明显变化(n=5,P>0.05)。结论:1、PE患者肠系膜动脉平滑肌细胞的BKCa通道活性较正常妊娠时被抑制。2、在贴附式膜片上,不同浓度TMp对PE患者肠系膜动脉平滑肌细胞的BKCa通道活性无明显影响。3、在内面向外式膜片上,一定浓度范围内TMp对PE患者肠系膜动脉平滑肌细胞的BKCa通道有激活作用,且这种激活作用有一定的浓度依赖性。4、TMp治疗PE时在细胞外和细胞内都可对BKca通道发挥作用。5、TMp对PE患者的治疗作用可能是通过直接激活肠系膜动脉平滑肌细胞的BKCa通道产生舒血管效应而实现的。