大白菜抗芜菁花叶病毒病基因的RAPD分子标记研究

来源 :中国农业科学研究院 中国农业科学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gaoruizhou
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大白菜(Brassica rapa L.ssp.pekinensis)是中国、日本、朝鲜等国家的主要蔬菜之一。以芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,TuMV)侵染为主的病毒病是危害白菜生产最严重的病害之一,直接导致大白菜产量低、质量差。TuMV由40多种蚜虫以非持续性方式传播,药剂防治成本高、效果差,并且污染产品和环境。培育抗病品种被认为是最有效、无环境污染和可持续发展的途径。因此,深入了解抗病毒病基因的遗传效应,获得其遗传模式的信息,并能将其导入优良品种是很有必要的。而分子标记技术是抗性基因筛选和鉴定的最有用工具之一。本研究以大白菜抗病与感病亲本杂交后自交所得的F2群体为材料,采用分离群体分群分析法(Bulked segregant Analysis,BSA),筛选与抗性基因紧密连锁的RAPD分子标记,主要结果如下:1.在温室隔离条件下进行苗期人工接种鉴定,对5叶期的幼苗接种TuMV-C4 株系,目测和酶联检测的结果显示,F2代的抗感分离比为3:1,计算的χ2 =0.068,小于(χ20.05(df=1)=3.84。这表明本研究所选用的这份抗性材料对 TuMV-C4株系的抗性应该存在主效基因控制。2.通过BSA方法,在300个随机引物中共有242个引物获得了扩增产物,出 现的谱带总数为1021条,平均每个引物扩增的谱带数为4.22条。筛选获得 一个在抗病池和感病池之间表现多态性的特异引物,OPV18,该引物扩增 出两条多态性谱带,片段长度分别为1400bp和820bp,分别命名为 OPV181400和OPV18820。经χ2检验,这两个标记带表现典型的3:1分离, 它们与抗性基因的遗传距离分别为9.5cM和15.36cM。3.讨论了将分子标记用于品种选育和进一步克隆抗病基因的可能途径。
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