【摘 要】
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目的：探讨颞叶癫痫发生过程中海马神经元核膜通透性改变状况。方法：将6-8周龄健康雄性SD大鼠114只,随机分为对照组(n=57只)和实验组(n=57只),每大组再分为SE后2h、7d和60d三个
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目的：探讨颞叶癫痫发生过程中海马神经元核膜通透性改变状况。方法：将6-8周龄健康雄性SD大鼠114只,随机分为对照组(n=57只)和实验组(n=57只),每大组再分为SE后2h、7d和60d三个亚组。应用氯化锂-匹罗卡品腹腔注射的方法制备癫痫模型,分别进行：1.观察所有致痫大鼠行为学和脑电图变化；2.用尼氏染色法观察大鼠海马的病理学改变(分别从对照组和实验组随机取6只)；3.余大鼠采用蔗糖密度梯度离心技术,分离纯化大鼠海马组织神经元细胞核,并观察分离纯化的效果；4.对提取的神经元细胞核用免疫荧光法,检测核膜通透性变化、细胞核凋亡情况,并验证核膜通透性改变发生部位与核孔的关系。结果：1.氯化锂-匹罗卡品大鼠癫痫模型：癫痫造模成功率为70.8%,总死亡率为18.6%。2.致痫大鼠自发性痫性发作：致痫大鼠慢性期均发生了自发性痫性发作。大鼠在SE后8-22天(14.9±6.4天)开始出现自发性痫性发作。3.脑电图变化：对照组以慢波为主,致痫大鼠急性期脑电图出现多种形式的痫样放电,典型波形有尖波、单棘波、多相棘波等发作性节律波；静止期大鼠脑电波亦以慢波为主,未见明显的痫样波；慢性期大鼠自发性痫性发作的脑电图可见以尖波为主的痫样波,且波幅较正常组高。4.SE后海马CA1区、CA3区和门区病理学改变：模型组大鼠门区神经元显著减少,CA1、CA3区锥体细胞排列紊乱及神经元丢失；部分模型大鼠齿状回颗粒细胞减少、细胞排列紊乱,或颗粒细胞层弥散化。5.蔗糖密度梯度离心结果：大鼠海马组织经蔗糖0.32M、2.2M、2.4M、2.6M和2.8M浓度梯度离心后,2.6-2.8M蔗糖层所含细胞核主要是神经元细胞核,还有极少量星形胶质细胞核。6.大鼠海马神经元细胞核免疫荧光结果(1)核膜通透性检测结果：从SE后2h、7d和60d组分离到海马神经元细胞核中,均包括数量不等的淡绿色阳性细胞核(渗漏细胞核),且显著多于对照组(P<0.01)；且渗漏细胞核的数量以2h和60d组最多,2h组尤甚(P<0.01)。(2)凋亡细胞核检测结果：从SE后2h、7d和60d组分离到海马神经元细胞核,均包括数量不等的凋亡细胞核。与对照组相比,2h和60d组凋亡细胞核最多,7d组较少(P<0.01)。(3)核膜通透性改变发生部位与核孔的关系：将SE后2h、7d和60d组大鼠海马组织中分离纯化的神经元细胞核分两份：一份未加核孔阻塞剂麦胚凝集素(WGA),可见不同数量的发生核膜渗漏的阳性细胞核。另一份预先加入WGA,各组细胞核均未发现明显核膜渗漏。结论：1.SE将导致海马神经元核孔损伤,增加其核膜通透性。2.核膜通透性增加的存活海马神经元可能参与了颞叶癫痫形成。
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