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连翘(Forsythia suspensa(Thunb.)Vahl),系木犀科(Oleaceae)连翘属(Forsythia)植物,是中国药典收载的常用中药,陕西省为连翘的道地产地之一。连翘长期以野生资源为主,近年来随着用量不断增加,野生资源难以满足市场的需求,连翘经济效益逐渐下滑,市场上出现品种混乱、缺少优良的植株和种质、质量参差不齐等突出问题。 目的:研究陕西连翘属的资源状况,并对4种连翘属植物进行实地调查;对陕西县区的野生连翘进行采样分析,并对连翘资源圃进行连翘植株筛选。 方法:1、陕西连翘属调查研究 实地调查并采集陕西分布的4种连翘属植物(奇异连翘、毛连翘、秦连翘、连翘),对其进行环境调查,测量外观形态进行观察描述并测量数据,主要对其植株植株、冠幅,果实的果实指数,叶子的叶型指数进行测量;采用HPLC法对果实中的连翘苷、连翘酯苷A,叶子中的芦丁、连翘苷、连翘酯苷A等指标进行含量测定,分析连翘属植物的果实、叶子含量与连翘的关系。 2、陕西连翘调查 对陕西省洛南县、山阳县、黄龙县、山阳县等县区内的野生连翘进行实地调查,对连翘资源的分布,测量连翘果实、叶子的形态,采用HPLC法对样品进行含量测定。 3、连翘植株筛选 对来自陕西省永丰镇陕西中医药大学连翘种植基地,用定株采样的方法,以单株个体为单位,在连翘实验地中根据其表型性状,选择符合要求优良的单株,分别测定其树高、基茎、冠幅、分支,并采集果实、叶子,对果实叶子的大小测量,并对样品折干率等指标记录分析。对42株候选连翘植株的果实叶子,采用HPLC法对连翘采集的果实、叶子含量。分别对连翘果实、叶子、花进行相关分析,综合分析连翘果实形态大小,果实连翘酯苷A、连翘苷,叶子大小,叶子芦丁、连翘酯苷A、连翘苷含量,花类型、花瓣合离瓣比等指标,采用主成分分析法对数据进行分析,根据连翘的得分筛选出连翘植株,并对连翘植株特征进行描述。 结果:1、陕西连翘属研究秦连翘果实果实小,表面无皮孔,果实中未检测到连翘酯苷A,且果实连翘苷含量为0.0276%,低于现行《中国药典》连翘药材标准(按干燥品计算0.15%);秦连翘叶片中芦丁含量8.2561%,连翘酯苷A与标准品在相同位置没有出峰,连翘苷位置处出现分裂的峰。毛连翘果实连翘酯苷A含量为4.0201%,连翘苷含量为0.3298%,符合现行《中国药典》中连翘的含量标准;叶子中主要成分含量芦丁含量为8.2342%,连翘酯苷A含量为2.4445%,连翘苷含量为1.6311%。连翘果实连翘酯苷A含量为5.2099%、连翘苷含量为0.3532%;叶子中芦丁8.9062%,连翘酯苷A含量为2.5181%,连翘苷含量1.6451%。奇异连翘果实连翘酯苷A含量为7.3188%、连翘苷含量为0.1628%,含量高于药典对连翘的规定;叶子中芦丁含量为6.4291%,连翘酯苷A含量为1.8249%,连翘苷含量为3.1388%。由聚类分析图验证分析表明连翘与毛连翘更为相似。 2、不同县区连翘果实含量都符合连翘药典标准,果实连翘苷百分含量中:山阳县(0.6324%)>宜君县(0.5309%)>黄龙县(0.4900%)>洛南(0.3532%),果实连翘酯苷A百分含量中:宜君县(11.9842%)>黄龙县(9.9093%)>洛南(5.2099%)>山阳县(4.3428%)。不同县区连翘叶,芦丁百分含量:宜君县(8.9075%)>洛南(8.9062%)>黄龙县(8.4777%)>山阳县(6.7463%),连翘酯苷A百分含量宜君县(2.8061%)>洛南(2.5182%)>山阳县(1.7951%)>黄龙县(1.6370%)连翘苷百分含量中:山阳县(3.3202%)>宜君县(2.0869%)>黄龙县(1.7758%)>洛南(1.6451%)。 3、对在连翘基地待选的植株进行表型外观指标测定,并进行含量测定,对连翘果实果型分析综合得分顺序为纺锤形>卵圆形>狭长型>椭圆形>长椭圆形。 结论:1、陕西连翘属调查研究结果表明,秦连翘果实含量远低于连翘药典标准,秦连翘作为连翘的伪品;毛连翘与奇异连翘果实连翘酯苷A与连翘苷的含量高于连翘药典标准,与连翘果实中的连翘酯苷A与连翘苷含量较为相近,因此可作为连翘的替代品或潜在的新资源,应做进一步的研究。根据叶子数据统计分析,表明奇异连翘都可作为连翘叶的新资源应用,毛连翘由于叶上密布短绒毛,因此可作为提取原料应用,秦连翘应深入研究其成分含量。 2、不同产地连翘进行相关性综合分析,并结合果实产量大小等进行分析,结果为4个县区采集的野生连翘果实含量都符合中国药典的含量要求,对样本数据进行聚类分析,结果为洛南和黄龙比较相近,归为一类,且调查发现洛南、黄龙连翘产量相对较多,果实也比较大。 3、通过对连翘果实、叶子表型外观指标测定和含量测定采用主成分分析法将独立的分析指标进行综合性评价,初步筛选出4株连翘果实较优的植株,3株连翘叶较优的植株,可作为连翘种植基地优质繁育种株。