利用一种新颖的化学法合成细胞粘附三肽RGD和胰酶催化合成Bz-RGD-（OEt）2

• 作 者: 赵密锋
• 出 处: 吉林大学
• 发表日期: 2006年期
• 关键词: RGD 肽合成 胰蛋白酶 有机溶剂

RGD是由精氨酸(Arg)、甘氨酸(Gly)、天冬氨酸(Asp)三个氨基酸组成的序列肽,是近几年来发现的具有生物活性的短肽序列之一。RGD序列肽能够竞争性抑制包括纤维蛋白Fib在内的各种粘附蛋白与血小板的结合,因而抑制了Fib与血小板的结合,使之在未来的临床应用中,具有较好的前景。它在内皮细胞的识别、抗血栓、抗血凝、抑制肿瘤、眼科诊治、治疗烧伤和皮肤溃疡等方面具有重要的作用。有关RGD肽类的合成也越来越显示其重要性和潜在的市场价值。本文的目的是对RGD三肽的合成工艺和路线进行初步的探讨,一方面研究了一种新颖的液相化学法(氨解取代法)合成GD二肽,N-羧基内酸酐法合成了游离RGD三肽,并摸索了几种因素对肽合成影响的程度,积累了相关数据,从而为RGD三肽的规模化制备提供理论基础和必要的技术常数。另一方面又以化学法与酶法相结合的方法合成了三肽RGD二乙酯。首先将氯乙酰化天冬氨酸氨解后得到的GD二肽,在乙醇作为溶剂体系的情况下通入干燥盐酸气体酯化,得到GD二乙酯[GD-(OEt)2],建立了一个简便、有效、经济的合成RGD前体二肽的模型。然后用胰蛋白酶作为催化剂,以Bz-Arg-OEt为底物,Gly-Asp-(OEt)2为亲核试剂,在水-有机溶剂双相体系中合成目标产物Bz-Arg-Gly-Asp-(OEt)2,研究了多种因素包括体系含水量、反应时间、pH值以及底物配比等对RGD序列肽的影响。建立了最佳反应模型:30℃,pH8.0,7%Tris-HCl缓冲液,93%乙醇,反应时间7小时,三肽的最大产率为75.2%。