含氮查耳酮衍生物孪药的合成及对胆碱酯酶作用的研究

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查耳酮(Chalcone)是一类存在于多种植物中的天然黄酮类化合物,具有很多重要的生物活性。近年来,许多研究者将目光聚集在这一类化合物上,取得了不少重要进展,本实验室在这几年陆续对这类化合物进行了构效关系方面的探索,如:将卡瓦胡椒素-B的结构进行简化,设计合成出一系列3’-叔胺烷氧基查耳酮类衍生物。以查耳酮为母核,合成出一系列4’-叔胺烷氧基查耳酮类衍生物和卤代查耳酮含氮衍生物并进行了构效关系的研究。本课题在上述研究基础上以乙酰胆碱酯酶双中心理论和孪药的设计原理设计并合成了一系列在查耳酮两端不同位置含不同叔胺基团和不同长度亚甲基链的查耳酮衍生物,并进行了其对乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶抑制作用的构效关系初步研究。本论文主要进行了以下几方面的工作:1、合成了一系列含不同长度亚甲基侧链的4,4’-二叔胺烷基查耳酮衍生物,构效关系研究的结果表明:所合成化合物对乙酰胆碱酯酶存在不同程度的抑制活性,但作为前体化合物的4,4’-二羟基查耳酮却没有相应的乙酰胆碱酯酶抑制活性,从而可以证实所合成化合物的末端叔胺取代基团为增强AChE抑制活性所必须的基团。后面所进行的关于构效关系的研究显示出不同末端叔胺取代基对这些化合物的AChE抑制活性的生物活性影响规律为:四氢吡咯基>哌啶基>二甲氨基。当末端取代基相同,不同链长的侧链取代时对化合物的AChE抑制活性的增强影响规律为:碳链长度为2时活性远大于其它化合物。化合物3a,3b和3c具有最强的AChE抑制活性和最高的AChE选择性。其IC50值分别达到0.16μmol/L、0.047 μmol/L 和 0.093 μmol/L。2、合成了一系列具有不同取代位置的高活性二叔胺乙氧基查耳酮衍生物,构效关系研究的结果表明:在所有三个位置,邻(2,4’-)、间(3,4’-)和对(4,4’-)位化合物中,间位化合物具有最高活性,在三种取代基(二甲氨基,四氢吡咯基和哌啶基)中,四氢吡咯取代的化合物有最优活性,所以当取代基位于间位,侧链为2-四氢吡咯乙氧基取代时,可得到具有最高活性化合物16b,其IC50为0.031μmol/L,是利斯的明的354倍。3、使用分子模拟对接软件探索了部分高活性4,4’和全部的2,4’-与3,4’-二叔胺烷氧基查耳酮的衍生物与乙酰及丁酰胆碱酯酶结合的类型和方式。实验的结果显示:具有高AChE抑制活性的化合物能同时与酶催化中心(CAS)和外周阴离子部位(PAS)的氨基酸结合,结合位点有四个,但较低活性的化合物一般只有两个甚至更少的结合位点。上述分子对接结果可部分解释化合物对胆碱酯酶抑制作用强度的差别。
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