【摘 要】
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目的:通过研究b FGF在骨髓间充质干细胞(BMSCs)定向分化为睾丸间质细胞(Leydigs)过程中的作用,探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)定向分化为睾丸间质细胞(Leydigs)的适宜方法。方
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目的:通过研究b FGF在骨髓间充质干细胞(BMSCs)定向分化为睾丸间质细胞(Leydigs)过程中的作用,探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)定向分化为睾丸间质细胞(Leydigs)的适宜方法。方法:通过全骨髓贴壁法获得大鼠骨髓间充质干细胞,将经纯化鉴定的BMSCs第3代细胞接种于六孔板,随机分为普通培养基对照组(A)、HCG+PDGF诱导组(B)、HCG+PDGF+5.0ng/ml b FGF诱导组(C)、HCG+PDGF+10.0ng/ml b FGF诱导组(D)、HCG+PDGF+20.0ng/ml b FGF诱导组(E),每组设3个复孔进行诱导,分别于第7天、14天、21天进行形态学观察、培养液睾酮水平及3β-羟化类固醇脱氢酶(3β-HSD)免疫荧光表达的阳性细胞数及其比例进行检测。结果:1)B、C、D、E组细胞诱导后,光学显微镜下细胞体积变大,细胞间互相连接呈长梭形或不规则形,贴壁生长,细胞核大,较圆,符合Leydig细胞的特点。2)随着诱导时间的增加、随着b FGF浓度的增加,B、C、D、E组睾酮水平逐渐升高,免疫荧光检测3β-HSD阳性表达细胞逐渐增多。其中:C、D、E组与B组,D、E组与C组间结果差异有统计学意义(P<0.05);D、E组之间结果差异无统计学意义(P>0.05)。诱导过程A组细胞培养液中未检测到睾酮,免疫荧光检测未见3β-HSD阳性细胞。结论:1)b FGF在大鼠BMSC细胞向Leydig细胞体外诱导分化过程中有明显促进作用。2)b FGF的浓度和诱导时间与其在大鼠BMSC细胞向Leydig细胞体外分化过程中的作用明显相关。
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